Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2019 |
Autor(a) principal: |
Queiroz, Júlio Henrique Ferreira de Sá
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Orientador(a): |
Simionatto, Simone
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Banca de defesa: |
Marchioro, Silvana Beutinger
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Ribeiro, Suzana Meira
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Tipo de documento: |
Dissertação
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal da Grande Dourados
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de pós-graduação em Biologia Geral/Bioprospecção
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Departamento: |
Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais
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País: |
Brasil
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Palavras-chave em Português: |
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Palavras-chave em Inglês: |
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Área do conhecimento CNPq: |
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Link de acesso: |
http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/2300
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Resumo: |
A incidência de sífilis tem aumentado de forma preocupante nas últimas décadas, com uma estimativa de 6 milhões de novos casos por ano no mundo. O diagnóstico da sífilis continua um desafio, devido à dificuldade de cultivo in vitro do Treponema pallidum. Nos últimos anos, novos testes treponêmicos têm sido desenvolvidos, utilizando antígenos recombinantes de T. pallidum. Esta abordagem conferiu uma maior especificidade e sensibilidade para a triagem dos pacientes com sífilis. No entanto, a busca por novos antígenos é fundamental para desenvolvimeno de um diagnóstico sorológico mais eficiente para detecção do T. pallidum. O objetivo desse estudo foi a produção dos antígenos recombinantes para diagnóstico sorológico da sífilis. A seleção dos antígenos foi baseada em estudos proteômicos com auxílio dos programas de bioinformática. Três genes que codificam para as proteínas Tp0684, Tp0750 e Tp0792 foram selecionados e submetidos síntese química, clonados no vetor pAE; as proteínas foram expressas em E. coli BL21 StarTM e purificadas por cromatografia de afinidade. A antigenicidade das proteínas recombinantes rTp0684, rTp0750 e rTp0792 foram avaliadas através da técnica de Western blot e ELISA com soros de pacientes com sífilis primária (n = 6), sífilis latente (n = 34) e soros controles não infectados (n = 10). As três proteínas recombinantes foram reconhecidas pelos soros de pacientes com sífilis primária e sífilis latente nas técnicas Western blot e ELISA, demonstrando serem antigênicas. Estes resultados indicam que os antígenos produzidos têm potencial para serem utilizados no desenvolvimento de testes sorológicos para a triagem de pacientes com sífilis. Além disso, a estratégia de utilização de proteínas recombinantes pode garantir um incremento na especificidade dos testes sorológicos reduzindo a ocorrência de resultados falsos positivos. Por outro lado possibilita um estudo racional de alvos com alta sensibilidade, diminuindo de forma significativa resultados falsos negativos e positivos. |