Efeito do fluorocitrato sobre o metabolismo e parâmetros astrogliais em células C6

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Selistre, Nicholas Guerini
• Orientador(a): Goncalves, Carlos Alberto Saraiva
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Astrócitos; Subunidade beta da proteína ligante de cálcio S100; Metabolismo energético
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/232667

Os astrócitos, células gliais mais abundantes do SNC, atuam como um componente ativo em funções cerebrais essenciais, tais como no metabolismo energético neuronal, dando suporte via lançadeira de lactato astrócito-neurônio (ANLS). Esse tipo celular é crucial na depuração do glutamato na fenda sináptica, reciclando-o através da glutamina sintetase (GS), sendo essa enzima um importante marcador astrocítico. Outro marcador muito utilizado é a proteína ligante de cálcio S100B, que é expressa e secretada principalmente por astrócitos. O fluorocitrato (FC) é um inibidor seletivo do metabolismo glial, principalmente em astrócitos, inibindo reversivelmente a enzima aconitase componente do ciclo de Krebs. Seus principais efeitos em astrócitos são alterações no metabolismo glutamatérgico e GABAérgico. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito do FC sobre metabolismo (energético e glutamatérgico) e a secreção da proteína S100B, em células astrogliais C6, que são modelos amplamente usados de astrócitos. Para isso, cultivou-se as células em DMEM com 5% de SFB, as quais posteriormente foram semeadas em placas de 24 poços e tratadas com FC nas concentrações de 1, 10 e 100 μM por 1 e 24 horas sem a presença de SFB. O teste estatístico utilizado para análise de resultados foi a ANOVA de uma via seguida do pós-teste de Tukey com significância p ˂ 0,05. Como resultados, nas concentrações utilizadas o FC não exerceu efeitos tóxicos que levariam à perda da viabilidade e integridade celular. O FC na concentração de 100 μM em 1 hora de tratamento promoveu alterações nas células astrogliais C6, como aumento da captação de glicose, captação de glutamato, aumento no conteúdo de GSH e aumento na secreção da proteína S100B em relação ao basal. Em 24 horas de tratamento houve diminuição na liberação de lactato (100 μM) e aumento na captação de glicose nas concentrações inferiores (1 e 10 μM de FC). Não foram observadas mudanças na atividade da enzima GS em 1 hora de tratamento. No presente estudo observou-se que o FC possui efeito sobre o metabolismo astroglial, alterando parâmetros energéticos e glutamatérgicos, bem como sobre o marcador astrocítico, a S100B. Essas mudanças e respostas que o tratamento por FC causa elucida o funcionamento astroglial e também ressalta as diferenças metabólicas entre células C6 e astrócitos. Esse trabalho é o primeiro a demonstrar a ação do FC em células astrogliais C6.