Implantação da técnica de PCR para estreptococos do grupo B (EGB) e detecção de alguns fatores de virulência

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Lannes, Pamella da Silva
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro Biomédico::Instituto de Biologia Roberto Alcantara Gomes; BR; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Biociências
• Palavras-chave em Português: Group B Streptococcus (GBS); PCR; Virulence genes; PFGE; Biofilm; Estreptococos do grupo B (EGB); PCR, genes de virulência; Biofilme; Reação em cadeia da polimerase; Infecções estreptocócitas Animais; Streptococcus Agalactiae; Fatores de virulências; Biomarcadores; Polimorfismo genético; Mastite bovina; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/16309

Streptococcus agalactiae ou Estreptococos do grupo B (GBS) é uma das principais causas de infecção invasiva neonatal e mastite bovina. A sorotipagem dos EGB é importante no que diz respeito às tendências epidemiológicas e o desenvolvimento de vacinas. A sorotipagem de EGB por aglutinação em látex tem sido o método predominante de tipagem, porém recentemente a genotipagem foi introduzida como método alternativo. Por esta razão, decidimos implantar a técnica de PCR em nosso laboratório para a tipagem de cepas humanas e bovinas. Além disso, foram analisados dois importantes fatores de virulência (laminina e pilus tipo 2a) e as sequências tipo, ST-1 e ST-17 como biomarcadores genômicos em todas as amostras de EGB. A genotipagem apresentou resultado em todas as 31 cepas de EGB (15 humanos e 16 animais), utilizando o método PCR. Nos isolados de humanos, o sorotipo III (46,67%) foi o mais predominante, seguido pelos sorotipos Ia (20%), V (20%) e II (13,33%). No entanto, todas as cepas bovinas de EGB foram genotipadas como II (100%). A tipagem molecular por PFGE demonstrou que amostras bovinas de EGB foram associadas com dois clones (A e B). O gene de virulência LMB foi detectado em 60% dos isolados humanos e em 93,75% das amostras de origem bovina, enquanto o pilus 2a foi detectado em 6,45% dos isolados. Além disso, ambas as amostras de humanos e bovinos testadas produziram biofilme em um modelo pilus-2a independente. Todas as cepas testadas apresentaram a sequência tipo ST-1, porém apenas a amostra 90356-líquor/III de EGB foi positiva para o ST-17, mostrando que este isolado pertence a um clone invasivo hipervirulento ST-17. Em conclusão, o método de PCR facilita a detecção de polimorfismo de DNA nos genes cps e foi implantado com sucesso no nosso laboratório.