ESTUDO DOS MECANISMOS DE SINALIZAÇÃO DO EFEITO DA UROGUANILINA SOBRE A H+-ATPASE EM TÚBULOS DISTAIS RENAIS

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: LIMA, VANESSA DA SILVA
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Fisiologia
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=84543

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">A uroguanilina é um peptídeo predominantemente sintetizado no intestino que modula</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">o balanço de sódio, potássio, cloreto e hidrogênio através de ações renais. Nos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">túbulos renais, este peptídeo atua alterando o funcionamento dos transportadores de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">prótons luminais. Dentre os transportadores luminais distais, a bomba de prótons</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">H+ATPase desempenha um papel importante na acidificação luminal. Em estudos com</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">recuperação de pH intracelular independente de sódio em células renais distais, a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">secreção de H+ é reduzida na presença de uroguanilina. O presente trabalho teve</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">como objetivo estudar os efeitos e os mecanismos moleculares de sinalização</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">envolvidos na ação da uroguanilina sobre a atividade da H+ - ATPase em túbulos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">distais. Para tanto, foram realizados estudos in vivo e/ou in vitro, nos seguintes grupos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">experimentais: grupo controle, grupo uroguanilina 1uM (UGN), grupo hexametileno 10-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">4 M (HMA) inibidor do permutador NHE, grupo concanomicina 10-7M (CONC) inibidor</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">da H+ATPase e grupo H89 10-4M inibidor da PKA. Nos estudos in vivo foi utilizada a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">técnica de microperfusão estacionária, na qual é medida a secreção de H+ em túbulos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">distais de rim de rato, utilizando um microelétrodo sensível a H+. Por meio deste</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">experimento, as seguintes variáveis foram analisadas: fluxo de bicarbonato J[HCO3</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-]</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">em (nmol.cm-2.s´1), meia vida de acidificação (T1/2) em segundos, concentração luminal</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de bicarbonato ([HCO3-) em mM e pH estacionário (pHe). Nos estudos in vitro, em</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">células MDCK C-11, foram realizados experimentos com Western blott para medir o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">nível de expressão da H+-ATPase subunidade B na superfície celular, o nível de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">expressão da H+ -ATPase total e o nível expressão da PKA total e pPKA (Thr 197).</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Ainda, nos estudos com MDCK C-11, foi realizado um imunoensaio enzimático por</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">meio do ELISA para medir a atividade da PKG. Nesta série de experimentos, as</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">células foram tratadas agudamente com UGN por 15 minutos. Como resultado, em</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">túbulos distais de rato, no grupo com a presença dos inibidores HMA e CONC</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(HMA+CONC) o JHCO3- foi inibido em relação ao grupo controle (0,32±0,013 x</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">0,86±0,12; P&lt;0.05 ) e apresentou comportamento inibitório semelhante quando</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">adicionado UGN a este grupo (HMA+CONC+UGN): 0,32 ± 0,054. O JHCO3- foi inibido</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">significativamente na presença de UGN 1uM (0,51±0,07), a adição de H89 (H89+UGN)</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">não foi capaz de abolir o efeito da UGN em túbulos distais (0,36±0,04). Nos estudos in</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">vitro, ocorre uma tendência de diminuição da expressão da H+- ATPase subunidade B</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">na superfície celular promovida por UGN em relação ao controle (68% x 100%), fato</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">que não foi observado na quantificação total dessa proteína em relação ao controle</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(98,38 % x 100%) A expressão proteica de PKA parece não ser alterada agudamente</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">por UGN em relação ao controle (101% % x 100%). Já a atividade da PKG aumentou</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cerca de 20 a 30% entre 10 e 15 minutos do tratamento com UGN. A partir dos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">resultados obtidos, conclui-se que UGN, agudamente, diminui o fluxo de secreção de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">H+ para o lúmen tubular distal por inibição da H+ ATPAse, modulando a expressão na</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">superfície celular da sua subunidade B1, com participação da via da PKG.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Uroguanilina. Secreção de Hidrôgenio. H+-ATPase.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Microperfusão renal.</span></font></div>