ALBUMINA MODULA A Na+ -ATPase DE TÚBULO PROXIMAL: POSSÍVEL PAPEL NA EXCREÇÃO RENAL DE SÓDIO

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: SILVA, ANDRESON CHARLES DE FREITAS
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Fisiologia humana
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=83721

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">RESUMO</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">A albumina é uma molécula aniônica de 69 kDa que apresenta uma concentração de&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cerca de 3,5 g/dL no plasma, representando aproximadamente 60% das proteínas&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">plasmáticas totais. Essa molécula também pode ser parcialmente filtrada e&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">reabsorvida no TP por meio do processo de endocitose mediada por receptor, que&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">tem a participação de um complexo formado por duas proteínas principais “megalina&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">e cubilina”. Albumina se liga a megalina desencadeando diversas respostas&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">celulares e nós hipotetizamos que a albumina module a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase, e&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">consequentemente participe da excreção renal de sódio. Diante disto o objetivo do&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">presente trabalho foi verificar o papel da albumina na modulação da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase em&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">células LLC-PK1 de túbulo proximal renal. Para isso usamos células LLC-PK1, entre&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">as passagens 20 a 60 cultivadas em DMEM, com SFB 10% a 37ºC e CO2 5%. As&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">células foram mantidas em meio sem soro por 6 horas e incubadas com diferentes&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">concentrações de BSA (0,01-20 mg/mL). Como resultados, verificamos que o&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">aumento da concentração de albumina promoveu uma diminuição na atividade da&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase, sendo o efeito máximo obtido na concentração de 20 mg/mL 50%. Foi&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">observado ainda que esta concentração apresentou seu efeito inibitório máximo&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">após 6h de incubação. O efeito inibitório da albumina sobre a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ATPase envolveu a inibição de PKC, efeito esse foi completamente revertido quando&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">utilizamos PMA (ativador de PKC), além de um aumento de 47% quando&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">administrado isoladamente comparado ao controle. Quando utilizado SFB 10%,&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ativador da via PI3K/PBK, houve uma reversão do efeito inibitório de albumina em&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">42%. Incubação com wortmanina 10-7 M (inibidor de PI3K) mimetizou o efeito&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">inibitório de albumina sobre a Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase, bem como quando utilizado PKBi&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(inibidor específico de PKB), mostrando que o efeito inibitório de albumina envolve&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">inibição de PKC e da via PI3K/PKB. Ao utilizarmos rapamicina 10-9 M (inibidor de&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">mTORC1), foi observado que a mesma reverteu o efeito inibitório de albumina. O&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">efeito de rapamicina sobre a atividade de mTORC1 foi confirmado através da&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">fosforilação de S6K no resíduo de (Thr389), substrato de mTORC1. Albumina&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">aumentou a fosforilação de S6K em 183% e esse efeito foi abolido por rapamicina,&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">mostrando a participação de mTORC1 no efeito inibitório de albumina sobre a&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase. O envolvimento de S6K sobre a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">foi medido quando adicionado PF-4708671 10-6 M (inibidor específico de S6K). O&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">PF-4708671 aboliu o efeito inibitório de albumina; por outro lado quando adicionado&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">isoladamente PF-4708671 mimetizou o efeito inibitório de albumina. Quando as&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">células foram incubadas com U0126 10-5 M (inibidor de ERK), observamos que o&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">U0126 também aboliu o efeito inibitório de albumina sobre a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ATPase. Esses dados mostram que a inibição da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase por albumina envolve&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">a ativação de ERK que pode por sua vez levar a ativação da via mTORC1/S6K.&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Estes dados mostram pela primeira vez que a albumina pode participar da</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">modulação do transporte de sódio, especificamente por diminuir a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ATPase. Este efeito pode ser importante em condições clínicas em que as&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">concentrações de albumina tubular estejam aumentadas como no curso da&nbsp;</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">hipertensão e do diabetes.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Albumina, túbulo proximal, excreção renal de sódio, Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase.&nbsp;</span></font></div>