Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2016 |
Autor(a) principal: |
SILVA, ANDRESON CHARLES DE FREITAS |
Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Dissertação
|
Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
|
Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
|
Departamento: |
Não Informado pela instituição
|
País: |
Não Informado pela instituição
|
Palavras-chave em Português: |
|
Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=83721
|
Resumo: |
<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">RESUMO</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">A albumina é uma molécula aniônica de 69 kDa que apresenta uma concentração de </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cerca de 3,5 g/dL no plasma, representando aproximadamente 60% das proteínas </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">plasmáticas totais. Essa molécula também pode ser parcialmente filtrada e </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">reabsorvida no TP por meio do processo de endocitose mediada por receptor, que </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">tem a participação de um complexo formado por duas proteínas principais megalina </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">e cubilina. Albumina se liga a megalina desencadeando diversas respostas </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">celulares e nós hipotetizamos que a albumina module a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase, e </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">consequentemente participe da excreção renal de sódio. Diante disto o objetivo do </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">presente trabalho foi verificar o papel da albumina na modulação da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase em </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">células LLC-PK1 de túbulo proximal renal. Para isso usamos células LLC-PK1, entre </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">as passagens 20 a 60 cultivadas em DMEM, com SFB 10% a 37ºC e CO2 5%. As </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">células foram mantidas em meio sem soro por 6 horas e incubadas com diferentes </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">concentrações de BSA (0,01-20 mg/mL). Como resultados, verificamos que o </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">aumento da concentração de albumina promoveu uma diminuição na atividade da </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase, sendo o efeito máximo obtido na concentração de 20 mg/mL 50%. Foi </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">observado ainda que esta concentração apresentou seu efeito inibitório máximo </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">após 6h de incubação. O efeito inibitório da albumina sobre a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ATPase envolveu a inibição de PKC, efeito esse foi completamente revertido quando </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">utilizamos PMA (ativador de PKC), além de um aumento de 47% quando </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">administrado isoladamente comparado ao controle. Quando utilizado SFB 10%, </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ativador da via PI3K/PBK, houve uma reversão do efeito inibitório de albumina em </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">42%. Incubação com wortmanina 10-7 M (inibidor de PI3K) mimetizou o efeito </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">inibitório de albumina sobre a Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase, bem como quando utilizado PKBi </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(inibidor específico de PKB), mostrando que o efeito inibitório de albumina envolve </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">inibição de PKC e da via PI3K/PKB. Ao utilizarmos rapamicina 10-9 M (inibidor de </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">mTORC1), foi observado que a mesma reverteu o efeito inibitório de albumina. O </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">efeito de rapamicina sobre a atividade de mTORC1 foi confirmado através da </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">fosforilação de S6K no resíduo de (Thr389), substrato de mTORC1. Albumina </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">aumentou a fosforilação de S6K em 183% e esse efeito foi abolido por rapamicina, </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">mostrando a participação de mTORC1 no efeito inibitório de albumina sobre a </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase. O envolvimento de S6K sobre a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">foi medido quando adicionado PF-4708671 10-6 M (inibidor específico de S6K). O </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">PF-4708671 aboliu o efeito inibitório de albumina; por outro lado quando adicionado </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">isoladamente PF-4708671 mimetizou o efeito inibitório de albumina. Quando as </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">células foram incubadas com U0126 10-5 M (inibidor de ERK), observamos que o </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">U0126 também aboliu o efeito inibitório de albumina sobre a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ATPase. Esses dados mostram que a inibição da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase por albumina envolve </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">a ativação de ERK que pode por sua vez levar a ativação da via mTORC1/S6K. </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Estes dados mostram pela primeira vez que a albumina pode participar da</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">modulação do transporte de sódio, especificamente por diminuir a atividade da Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">ATPase. Este efeito pode ser importante em condições clínicas em que as </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">concentrações de albumina tubular estejam aumentadas como no curso da </span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">hipertensão e do diabetes.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Albumina, túbulo proximal, excreção renal de sódio, Na+</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">-ATPase. </span></font></div> |