USO DE PLANTAS BIORREATORAS PARA A PRODUÇÃO DO ANTÍGENO RECOMBINANTE K39 FUSIONADO A HIDROFOBINA E SUA APLICAÇÃO BIOTECNOLÓGICA NA LEISHMANIOSE VISCERAL

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: SILVA, BRUNO BEZERRA DA
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Biotecnologia
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=87143

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">A expressão transiente de proteínas heterólogas em plantas possibilita o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">desenvolvimento de vacinas, de biofármacos e de kits para o diagnóstico de doenças</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">negligenciadas, como a leishmaniose visceral. Para tanto, o antígeno K39 de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Leishmania infantum foi expresso fusionado à proteína parceira hidrofobina I e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">direcionado ao retículo endoplasmático da célula vegetal, resultando no construto ,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">rK39-HFBI. A produção e purificação de rK39-HFBI foram otimizadas e demonstraram</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">maior acúmulo da proteína de interesse em 4 dias após a agroinfiltração e sob</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">concentrações de 4 % e 8 % de agente surfactante para sua purificação. O processo</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de purificação resultou em produto denominado de rK39-HFBI semi-purificada, uma</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">vez que apresentava proteínas contaminantes oriundas do tecido vegetal. Anticorpos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de antisoro de camundongos e de soro de cães naturalmente infectados com L.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">infantum reconheceram o construto rK39-HFBI, sem demonstrar reatividade cruzada</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">contra as demais proteínas de origem vegetal. Para a validação de ensaio de ELISA</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">utilizando rK39-HFBI semi-purificada foi empregado um painel de 158 soros caninos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">testados segundo o protocolo oficial do Ministério da Saúde do Brasil, contra o qual o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">teste desenvolvido apresentou 90,7 % de sensibilidade e 97,5 % de especificidade.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Os ensaios de imunização em camundongos BALB/c demonstraram que a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">administração do antígeno por via subcutânea foi capaz de induzir forte produção de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">anticorpos na resposta primária, com prevalência de anticorpos do isótipo IgG1 mas</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">também ativando mudança de classe para a produção de IgG2a. Quando</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">administrado como vacina de mucosa associado a adjuvantes, o construto também foi</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">capaz de elicitar a ativação de linfócitos T. Dessa forma, demonstra-se a aplicabilidade</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">biotecnológica do construto rK39-HFBI para o diagnóstico e controle da leishmaniose</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">visceral, assim como reafirma-se o potencial do sistema de expressão em plantas para</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">a produção de insumos contra as doenças tropicais negligenciadas, estimulando</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">assim a soberania do Brasil e dos demais países em desenvolvimento no setor da</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">saúde.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chaves: Expressão transiente em plantas. Proteínas recombinantes.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Leishmaniose visceral. rK39. Hidrofobinas. Imunodiagnóstico. Imunização.</span></font></div>