PRODUÇÃO DE ANTÍGENOS RECOMBINANTES DO VÍRUS DENGUE (DENV) EM PLANTA PARA FINS VACINAIS E DE IMUNODIAGNÓSTICO

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: MARQUES, LÍVIA ÉRIKA CARLOS
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Biotecnologia
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=84567

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Dengue vírus (DENV) é um flavivírus transmitido aos seres humanos através da picada</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de mosquitos Aedes infectados. A doença associada a esse vírus causa um espectro de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">sintomas que varia desde infecção assintomática ou doença febril branda a febre</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">hemorrágica e síndrome do choque, o que pode ser fatal. O vírus dengue tem se tornado</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">uma grande ameaça no mundo todo, com bilhões de pessoas vivendo em áreas com</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">risco de infecção e milhares morrem a cada ano. Há uma demanda por antígenos para</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">serem utilizados na fabricação de kits de diagnóstico em larga escala. E a vacina</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">recentemente licenciada em alguns países, Dengvaxia (CYD-TDV) da Sanofi Pasteur,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">mostrou eficácia de apenas 60,8 % e proteção parcial contra o sorotipo 2. Todavia, uma</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">vacina segura deve oferecer proteção contra todos os quatro sorotipos (DENV 1, 2, 3 e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">4). O objetivo desse estudo foi produzir peptídeos virais para formulação de uma vacina</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">recombinante de subunidades e para uso como antígenos em kits de diagnostico. O</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">sistema de expressão transiente em planta se mostrou uma alternativa adequada para</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">produção destas proteínas. Além disso, duas estratégias foram avaliadas para aumentar</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">a acumulação das proteínas do DENV em planta, o direcionamento dessas proteínas</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">para diferentes compartimentos subcelulares e adição de tags de purificação, tais como</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de elastina like polipeptídeo (ELP) e hidrofobina (HFBI). É a primeira vez que tais</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">estratégias estão sendo avaliadas para aumentar os níveis de acumulação e facilitar a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">purificação de proteínas recombinantes do vírus dengue produzidas em planta. A</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">proteína não estrutural 1 (NS1) fusionada a tag ELP mostrou um aumento de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">aproximadamente quarenta vezes em níveis de acumulação em comparação com a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">proteína não fusionada (NS1-ER) e alcançou níveis de expressão de até 166 &#956;g/g por</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">peso fresco de folha. Todavia o polipeptídio quimérico contendo o domínio III do envelope</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(EDIII 1-4) dos quatro sorotipos do DENV fusionada a ELP e direcionada ao ER EDIII1-</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">4-ER-ELP alcançou níveis ainda maiores de acumulação de até 195 &#956;g/g. Diante dos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">resultados aqui apresentados, a expressão de proteínas do vírus dengue de até 195 &#956;g/g</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">de peso fresco de folha aqui estabelecida é uma quantidade de sólida base econômica,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">o que facilita o processamento, a purificação, bem como a formulação de vacina e</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">produção de antígenos a serem utilizados como reagentes em kits de diagnóstico de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">baixo custo.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Dengue vírus. NS1. Domínio III do envelope. Proteína recombinante.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Vacina de subunidades. Diagnóstico. Quimera.</span></font></div>