Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2018 |
| Autor(a) principal: |
Araújo, Lucelina da Silva |
| Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: |
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| Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=106921
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Resumo: |
<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">A Leishmaniose visceral (LV) é uma doença zoonótica grave que pode levar a morte. A </span></font><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">doença é um sério problema de saúde, sendo endêmica em 80 países e sua prevalência excede </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">1 milhão de casos no mundo. Este estudo teve por objetivo desenvolver antígeno vacinal </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">recombinante eficaz, que confira proteção contra Leishmania chagasi, bem como o </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">desenvolvimento de um kit de diagnóstico para leishmaniose visceral canina. A sequência que </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">codifica a proteína K39 (antígeno K39 da região quinase de L. chagasi) foi sintezada e </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">otimizada com sucesso para expressão nos sistemas eucariótico (planta) e procariótico. Para a </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">produção bacteriana, o gene sintetizado foi subclonado em vetor de expressão pET28a e </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">expresso em Escherichia coli cepa BL21 (DE3). Na expressão transiente em Nicotiana </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">benthamiana o gene K39 foi clonado em vetor de expressão pCAMGATE-Hydrofobin. </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Diferentes grupos de camundongos BALB/c foram imunizados com a proteína k39 produzida </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">em E. coli, seja da forma purificada (rk39), ou com a bactéria inativada contendo o plasmídeo </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de expressão e a proteína (BL21-rK39), após imunização o perfil de resposta imunológica foi </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">avaliado. Os grupos imunizados com a proteína k39 (rK39 e BL21-rK39) apresentaram alta </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">produção de anticorpos específicos já na resposta primária com níveis elevados de IgG e </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">subclasses IgG1 e IgG2a, quando comparados ao grupo que não apresentava a proteína em </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">sua composição (BL21-Mock). Estes grupos também apresentaram altos níveis de IL-4 no </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">figado. A rK39 produzida em planta e direcionada para o diagnóstico (ELISA), contra soros </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">de cães positivos para Leishmaniose visceral, apresentaram uma sensibilidade de 90,7% e </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">especificidade de 97,5%. A plataforma eucariótica é uma opção viável e promissora na </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">produção de antígenos para utilização no imunodiagnóstico de cães com leishmaniose, bem </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">como na produção de antígenos direcionados para imunização de animais. A proteína k39 </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">apresentou capacidade de ativação da resposta imune em camundongos utilizados como </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">modelo animal, destacando-se não só para utilização no diagnóstico mas também pelo seu </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">potencial para ser utilizada como imunógeno. </span></div><div style=""><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Palavras-chaves: Leishmaniose visceral. rK39. Nicotiana benthamiana. E. coli. Hidrofobina. </span><span style="font-size: 13.3333px; font-family: Arial, Verdana;">Imunodiagnóstico. Resposta Imune. </span></div> |
