EFEITO DO ANETOL NA SOBREVIVÊNCIA E DESENVOLVIMENTO IN VITRO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS CAPRINOS ISOLADOS

• Ano de defesa: 2014
• Autor(a) principal: SÁ, NAIZA ARCÂNGELA RIBEIRO DE
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Caprinocultura
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=84796

O anetol é uma fração de óleo essencial extraído da planta Croton zehntneri. Tal substância<br/>apresenta atividades biológicas cientificamente comprovadas como, por exemplo, ação<br/>antioxidante. Entretanto, não se sabe quais os efeitos do anetol sobre a fisiologia reprodutiva,<br/>sobretudo, sobre cultivo in vitro de folículos pré-antrais caprinos. Portanto, o objetivo desse<br/>estudo foi investigar o efeito de três concentrações de anetol (30, 300 e 2000 &#956;g/mL) sobre a<br/>sobrevivência, a formação de antro, o diâmetro folicular e a maturação oocitária, além dos<br/>níveis de transcritos para os genes ICAM-1, CAV-1, TIMP-2 e PAI-1, bem como os níveis de<br/>espécies reativas de oxigênio (EROs) em folículos ovarianos pré-antrais caprinos isolados<br/>antes e após cultivo in vitro por 18 dias. Folículos pré-antrais foram isolados de ovários de<br/>cabras e cultivados individualmente em meio essencial mínimo alfa modificado (&#945;-MEM+),<br/>constituindo o tratamento controle, ou ainda &#945;-MEM+ suplementado com ácido ascórbico na<br/>concentração de 100 &#956;g/mL (AA), ou &#945;-MEM+ suplementado com três diferentes<br/>concentrações de anetol (30, 300, 2000 &#956;g/mL) durante um período de 18 dias, sendo os<br/>tratamentos denominados &#945;-MEM+, AA, AN30, AN300 e AN2000, respectivamente. Após o<br/>período de cultivo, os folículos foram cuidadosamente abertos, sendo retirados os complexos<br/>cumulus oócitos (CCOs), os quais foram destinados à maturação in vitro (MIV). As paredes<br/>dos folículos foram destinadas à quantificação do RNAm por reação em cadeia polimerase em<br/>tempo real (RT-PCR). Finalmente, o meio coletado durante as trocas, bem como ao final do<br/>cultivo foi utilizado para as dosagens de EROs. Após 18 dias de cultivo, o tratamento AA<br/>apresentou o percentual de folículos intactos, bem como o diâmetro folicular<br/>significativamente superiores quando comparado aos demais tratamentos. Entretanto, as taxas<br/>de crescimento diária e de folículos que formaram antro in vitro, bem como o diâmetro<br/>oocitário foram similares entre o tratamento AA e àqueles com adição de anetol. Além disso,<br/>quando comparadas ao AA, a taxa de oócitos destinados à MIV (diâmetro &#8805; 110 &#956;m), bem<br/>como a taxa de retomada da meiose foram significativamente superiores nos tratamentos<br/>AN30 e AN2000, respectivamente. Vale ressaltar que foram observados oócitos em metáfase<br/>II (MII) em todos os tratamentos testados (&#945;MEM+, n= 2; AN30, n=4; AN300, n=5, e<br/>AN2000, n=4), exceto no AA (AA, n=0). Quando avaliados os genes relacionados ao<br/>remodelamento da membrana basal, diferenças significativas nos níveis de RNAm para<br/>ICAM-1, CAV-1, TIMP-2 e PAI-1 foram verificadas em comparação ao dia zero, ou seja, no<br/>controle não-cultivado. Em adição, as concentrações de EROs no dia 6 de cultivo foram<br/>significativamente inferiores nos tratamentos AN30 e AN2000 quando comparados aos<br/>10<br/>demais tratamentos. A partir do dia 12, todos os tratamentos com adição de anetol apresentam<br/>valores significativamente inferiores ao &#945;-MEM+ e AA. Diante do exposto, pode-se concluir<br/>que a adição de anetol no meio de cultivo in vitro foi capaz de melhorar o desenvolvimento de<br/>folículos pré-antrais caprinos, reduzindo as concentrações de EROs e promovendo aumento<br/>no percentual de oócitos capazes de retomar a meiose.<br/>Palavras-chave: Espécies reativas de oxigênio, maturação in vitro, anetol, antioxidante.