Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2019 |
Autor(a) principal: |
Kawafune, Eunizinis dos Santos |
Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Dissertação
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Palavras-chave em Português: |
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Link de acesso: |
http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/41/41132/tde-05032020-094343/
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Resumo: |
Os microrganismos representam uma espetacular fonte de metabólitos bioativos que podem apresentar aplicações como agentes agrotóxicos, antibióticos, imunossupressores, antiparasitários, antitumorais, entre outros. Nesse grupo, os fungos endofíticos apresentam grande potencial na caracterização de substâncias bioativas, especialmente componentes citotóxicos. O objetivo geral deste trabalho foi contribuir com o conhecimento a respeito da diversidade química e biológica de fungos endofíticos associados aos indivíduos masculino e feminino de Baccharis oxyodonta DC. (Asteraceae). Para tal, os fungos endofíticos dos indivíduos feminino e masculino de B. oxyodonta foram isolados e identificados por sequenciamento da região ITS e construção de árvores filogenéticas. No indivíduo feminino foram isolados 28 fungos pertencentes aos gêneros Alternaria, Annulohypoxylon, Cercospora, Colletotrichum, Phomopsis e Preusia, e as famílias Dydimellaceae e Strophariaceae. Já do indivíduo masculino foram obtidos 20 fungos distribuídos entre os gêneros Alternaria, Aspergillus, Cladosporium, Penicillium, Periconia e Phomopsis. Para cultivo das cepas utilizou-se três meios de cultivos diferentes (arroz, BDA e Czapek). Após extração, as 136 amostras resultantes foram analisadas por CLAE/EM-EM e, a partir dos dados obtidos, foi realizada uma análise metabolômica que possibilitou a visualização do impacto das diferentes condições de cultivo no perfil metabólico das cepas. Dessa análise pode-se verificar que o meio de cultivo BDA gerou a maior diversidade metabólica e, também, foram identificadas diferentes classes de substâncias tais como, antraquinonas, xantonas, amidas, lactonas sesquiterpenicas, ácidos graxos, isocumarinas, dicetopiperazinas e policetídeos. Os extratos foram avaliados em relação ao potencial citotóxico, utilizando o ensaio do MTT, sendo 11 extratos considerados ativos frente a linhagem tumoral HCT-116 (carcinoma colorretal), quando testados na concentração de 50 μg.mL-1. Com base nos resultados de citotoxicidade e do perfil metabólico, duas cepas, Alternaria sp. 1 ePhomopsis sp. 4, foram selecionadas para o cultivo em larga escala. Após procedimentos cromatográficos e análise espectral dos isolados, quatro componentes do extrato bruto de Alternaria sp. 1 foram identificados como alternariol, alternariol-metiléter, altenusina e 5\'-metoxi-6-metil-bifenil-3,4,3\'-triol e, a partir do extrato bruto de Phomopsis sp. 4 foram identificadas a sidowinina B, o ácido 8-hidroxi-6-metil-xantona carboxílico, inéditos no gênero, e phomopsixantona, inédita em literatura. As substâncias foram avaliadas em relação a citotoxicidade entretanto apenas o alternariol exibiu atividade de inibição moderada frente a linhagem tumoral HCT-116 |