Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2020 |
| Autor(a) principal: |
Peñafiel, Rosmary Rebaza |
| Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Dissertação
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: |
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| Link de acesso: |
https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-25092023-100310/
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Resumo: |
Poli-3-hidroxibutirato (P(3HB)) é um polímero da família dos polihidroxialcanoatos (PHA) produzido por bactérias e que despertam interesse industrial por serem termoplásticos biodegradáveis e biocompatíveis. A síntese de P(3HB) requer intermediários metabólicos (NADPH e acetil-CoA), que também são necessários para o crescimento celular. P(3HB) pode ser produzido por linhagens recombinantes de Escherichia coli associado ao crescimento celular e sua síntese pode ser melhorada com o aumento da oferta de NADPH. Neste trabalho, foi avaliado o impacto sobre a produção de P(3HB) do uso de linhagens recombinantes de E. coli expressando gliceraldeido-3-fosfato desidrogenase (GAPDH) apresentando capacidade de suprir maior quantidade de NADPH. A substituição total da gliceraldeido-3-fosfato desidrogenase NAD+ dependente por uma NADP+ dependente levou à maior crescimento e menor produção de P(3HB). Nos cultivos em biorreator a linhagem mutante (TUD15) produziu menos P(3HB) do que a linhagem selvagem (MG1655), indicando que o grande aumento do suprimento de NADPH pode contribuir no crescimento celular, mas não são relevantes para aumentar a produção de P(3HB). A substituição parcial da gliceraldeido-3-fosfato desidrogenase NAD-GAP por NADP-GANP aumentou expressivamente a capacidade de acúmulo de P(3HB), que atingiu 50% da massa seca celular em agitador rotativo. Nos cultivos em biorreator, ficou clara a maior capacidade de crescimento e de acúmulo de P(3HB) com a expressão simultânea das duas enzimas. Em conjunto, os resultados sugerem que um balanço adequado de acetil-CoA, NADPH e ATP é necessário para se atingir crescimento e produção de P(3HB) eficientes em E. coli. Os dados obtidos neste trabalho devem contribuir na busca de modelos metabólicos que melhor representem E. coli e permitirão identificar condições mais apropriadas para o crescimento celular e a produção de P(3HB). |
