Diversificação e incremento da produção de fomactinas pelo fungo Biatriospora sp

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Oliveira, Leandro da Silva
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: fungi; fungos; metabólitos secundários; metabolômica; metabolomics; natural products; produtos naturais; secondary metabolites
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/75/75133/tde-13122022-100522/

Fomactinas são produtos naturais diterpênicos que apresentam atividade inibidora do receptor do fator de ativação de plaquetas. São também capazes de reduzir a repopulação de células tumorais após radiação com raios-γ, atividade esta que pode ser explorada como adjuvante no tratamento de cânceres. Em estudo recente, demonstrou-se a produção de fomactinas pela linhagem fúngica Biatriospora sp. CBMAI 1333. O presente projeto objetiva a avaliação de diferentes meios de cultura e condições de cultivo para o fungo Biatriospora sp. CBMAI 1333, de maneira a alcançar maior diversidade na produção de fomactinas e maior rendimento em massa para a obtenção destes compostos. Em uma segunda etapa, foi realizado o isolamento e identificação de fomactinas ou análogos potencialmente inéditos. Extratos de diferentes meios de cultivo de Biatriospora sp. CBMAI 1333 foram analisados por UPLC-MS/MS. Os resultados obtidos foram avaliados empregando-se a criação de redes moleculares e comparações estatísticas por meio da plataforma XCMS. Uma vez selecionado o meio de cultura mais promissor para o crescimento do fungo e produção de fomactinas, realizou-se o cultivo da linhagem fúngica em escala ampliada. Após a obtenção do extrato do meio de cultivo em condições melhoradas, este foi fracionado utilizando-se técnicas cromatográficas diversas. As fomactinas V e I foram isoladas e completamente caracterizadas por técnicas de RMN e espectrometria de massas. De modo a se incrementar ainda mais o rendimento da produção de fomactinas, foi realizado um Planejamento Fatorial Fracionado (PFF), que resultou em uma condição de crescimento otimizada. Após um novo crescimento otimizada do fungo Biatriospora sp. CBMAI 1333 e avaliação dos dados empregando-se a ferramenta Feature-Based Molecular Networking (FBMN), observou-se um feature cujo íon protonado indicava a presença de um átomo de nitrogênio em sua estrutura. Este composto foi isolado e caracterizado utilizando-se técnicas espectroscópicas e espectrometria de massas, confirmando a estrutura de uma fomactina nitrogenada inédita. A utilização de diversas ferramentas de metabolômica possibilitou incrementar e diversificar a produção de fomactinas pelo fungo Biatriospora sp. CBMAI 1333, resultando na descoberta da primeira fomactina nitrogenada.