Avaliação do papel terapêutico do microRNA-29b em um modelo pré-clínico da doença de Peyronie

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Cândido, Patricia Rodrigues
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Colágeno; Collagen; Doença de Peyronie; Extracellular matrix; Fator de crescimento transformador beta 1; Fibrose; Fibrosis; Matriz extracelular; MicroRNA; Peyronie's disease; Transforming growth factor beta 1
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5153/tde-20042023-120958/

Introdução: A doença de Peyronie (DP) é caracterizada pela formação de placas fibróticas na túnica albugínea (TA) do pênis. Os tratamentos efetivos são limitados e a cirurgia continua sendo a melhor opção, apesar de não regredir a doença. Nesse sentido, é crescente a busca por novas opções de tratamento. A terapia com microRNAs (miRNAs) é uma alternativa atraente para diversas patologias, por atuarem na regulação da expressão gênica. O miRNA-29b está envolvido na regulação de genes da matriz extracelular, como os genes de colágenos, e sua expressão diminuída pode ser encontrada em doenças fibróticas, inclusive na DP. Uma vez que o aumento da síntese de colágeno é fundamental para o desenvolvimento de fibrose, o controle da expressão de genes envolvidos na DP por miRNA, pode tornar-se uma estratégia terapêutica potencial. E ainda não existem estudos que avaliaram o papel terapêutico do miRNA-29b na DP. Objetivos: Caracterizar o perfil de expressão gênica do COL1A1, COL3A1 e TGF-1 em amostras de tecido peniano de pacientes com a DP e em indivíduos sem a doença. Estabelecer o modelo pré-clínico da DP e avaliar o papel terapêutico do miRNA-29b in vivo. Analisar a expressão do miRNA-29b e dos genes COL1A1, COL3A1 e TGF-1, antes e após o tratamento com o miRNA. Métodos: O estudo com os pacientes, foi composto por 8 amostras de placa fibrótica e 11 amostras da TA adjacente de indivíduos com DP. O grupo Controle foi composto por 13 amostras da TA de pacientes sem DP. Para o tratamento in vivo,18 ratos machos da linhagem Sprague-Dawley foram divididos em grupo Controle (n = 6), grupo Fibrose+miRNA-29b (n = 6) e grupo Fibrose+miRNA negativo (Scramble) (n = 6). A indução da placa fibrótica ocorreu através de injeções na TA de 100 L de solução fibrina e 100 L de solução trombina. O tratamento com o mimic do miRNA-29b ou seu controle negativo foi realizado após as injeções de fibrina e os grupos Controle receberam injeções de salina. Ao final do estudo, os animais foram eutanasiados e tiveram o tecido peniano coletado. Resultados: Nas amostras dos pacientes, os genes COL1A1 e COL3A1 foram superexpressos no grupo Peyronie Placa (p = 0,02 e p = 0,02, respectivamente) e no grupo Peyronie TA adjacente (p = 0,02 e p = 0,05, respectivamente) quando comparados ao grupo Controle. O TGF-1 foi subexpresso no grupo Peyronie Placa em relação ao Controle (p = 0,005). O estabelecimento do modelo pré-clínico foi confirmado a partir das análises histopatológicas com a identificação de fibrose. Após o tratamento, o grupo Fibrose+miRNA-29b apresentou diminuição do processo fibrótico na TA. O miRNA-29b foi superexpresso neste grupo em relação ao Scramble e Controle (p = 0,02 e p = 0,003, respectivamente). O COL1A1 e o COL3A1 foram subexpressos no grupo Fibrose+miRNA-29b em relação ao Scramble e Controle (p = 0,02 e p = 0,02, respectivamente), e o TGF-1 também foi subexpresso no grupo tratado em relação ao Scramble (p = 0,001). Conclusão: Nas amostras teciduais dos pacientes, o COL1A1 e COL3A1 foram superexpressos na placa e TA adjacente e o TGF-1 subexpresso na placa fibrótica. Confirmamos o estabelecimento do modelo pré-clínico da DP, com subexpressão do miRNA-29b e superexpressão dos genes COL1A1 e TGF-1. Após o tratamento, demonstramos que a superexpressão do miRNA-29b foi capaz de atenuar a fibrose no modelo de rato da DP