Impacto da idade paterna avançada na reprodução utilizando o modelo murino

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Stabile, Larissa Araujo
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Camundongos; Comportamento sexual; Desenvolvimento embrionário; Embryo development; Envelhecimento paterno; Espermatozoide; Mice; Paternal aging; Sexual behavior; Sperm
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-22072024-095150/

Este estudo trabalhou com a hipótese de que camundongos senis apresentam alterações nos níveis de testosterona, comportamento sexual e fisiologia espermática, influenciando negativamente os processos de fecundação e desenvolvimento embrionário inicial in vitro. Três experimentos (capítulos) foram conduzidos, utilizando camundongos machos da linhagem C57BL/6J com idades de 4 (grupo controle/jovens), 19 e 24 (grupos experimentais/senis) meses. No primeiro experimento foram realizados testes comportamentais, incluindo campo aberto, labirinto em T elevado e interação social com fêmeas jovens sincronizadas. Os machos senis apresentam menor atividade de locomoção exploratória no teste de campo aberto e menor tempo de interação social com as fêmeas sincronizadas. No segundo experimento, a capacidade reprodutiva dos machos foi avaliada. Foram avaliados níveis séricos de testosterona, peso testicular, morfologia espermática, integridade das membranas plasmática e acrossomal (FITC/IP), estresse oxidativo (CELLROX green), potencial da membrana mitocondrial (JC1), susceptibilidade da cromatina ao desafio ácido (SCSA modificado) e respectiva condensação (CMA3), status da capacitação espermática (CTC) e os impactos na taxa de fecundação in vivo. O grupo de 24 meses apresentou menor nível sérico de testosterona. Os grupos senis apresentaram menor peso dos ambos os testículos (direito e esquerdo), maior porcentagem de defeitos individuais e totais (individuais mais multi defeitos) em comparação ao grupo controle. O grupo 19 meses demonstrou maior porcentagem de defeitos de cauda e multi defeitos e o grupo 24 meses maior porcentagem de células com defeitos de peça intermediária. Machos com 19 meses exibiram maior potencial de membrana mitocondrial intermediário e membrana plasmática lesada com estresse oxidativo. O grupo de 24 meses apresentou maior porcentagem de espermatozoides deprotaminados. A porcentagem de espermatozoides capacitados estava diminuída nos grupos senis em relação ao controle, sendo que o de 19 meses apresentou aumento de espermatozoides com capacitação precoce. No terceiro experimento, foram analisadas as taxas de desenvolvimento embrionário in vitro, estágios específicos de blastocistos e a primeira diferenciação celular (CDX2 e SOX2) de embriões provenientes de fêmeas jovens acasaladas com os machos dos grupos controle e experimentais. O grupo de 24 meses apresentou menores taxas de clivagem (D1,5), taxa de formação de blastocisto e de desenvolvimento embrionário (D4,5). Na avaliação dos estágios específicos de blastocistos observou-se que o grupo 19 meses apresentou maior taxa de blastocisto inicial (BI), e os grupos senis apresentaram menores taxas de blastocistos expandidos (BX) e eclodidos (BE). Houve uma redução na quantidade de células totais e de trofectoderma (positivas para CDX2) nos grupos senis. O grupo de 24 meses apresentou menor número de células para massa celular interna (positivas para SOX2). Os grupos senis exibiram uma redução na intensidade de fluorescência para CDX2. Especificamente, o grupo de 24 meses apresentou menor intensidade de fluorescência para SOX2. Esse estudo evidenciou o efeito negativo da idade paterna sobre o comportamento sexual, qualidade espermática, podendo acarretar no atraso da primeira divisão celular e consequentemente pior desenvolvimento embrionário inicial in vitro.