Investigação funcional do novo locus candidato, HDAC9, causativo da síndrome aurículo-condilar

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Ramos, Sofia Lígia Guimarães
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: 1. Auriculocondylar Syndrome; 1. Síndrome Aurículo-condilar; 2. Craniofacial development; 2. Desenvolvimento craniofacial; 3. Genética; 3. Genetics; 4. iPSC; 5. Células de crista neural; 5. Neural crest cells; 6. Ossificação; 6. Ossification
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/41/41131/tde-25052021-091729/

A Síndrome Aurículo-Condilar (ACS) é uma doença genética rara que acomete as estruturas oriundas do primeiro e segundo arco faríngeo, resultando em micrognatia, malformações auriculares e displasia do côndilo mandibular. A ACS segrega majoritariamente de forma autossômica dominante com penetrância incompleta, mas há poucos casos reportados cujo o padrão é autossômico recessivo. Além disso, há expressividade variável inter e intra-familial e também heterogeneidade genética. Até o presente momento, foram identificadas variantes em três genes envolvidos na via EDN1-DLX5/6: GNAI3, PLCB4 e EDN1. Estudos feitos em nosso laboratório sugeriram a existência de um quarto locus relacionado à síndrome, uma vez que mutações nos 3 genes já associados a ACS foram excluídas em uma família brasileira com 11 afetados por ACS e estudos de ligação indicaram que a variante está localizada no cromossomo 7 (7p21.1-p15.2). Em um trabalho em colaboração com a Universidade de Oxford, identificamos uma duplicação em tandem de cerca de 400kb na região candidata do cromossomo 7, que inclui o gene HDAC9, nos indivíduos desta família brasileira. O presente trabalho teve como objetivo, portanto, investigar a variante causativa da ACS nesta família a fim de verificarmos se a duplicação identificada no cromossomo 7 tem relação causal com o fenótipo, uma vez que é a única família até o momento com alteração nesta região. Para responder nossa pergunta de pesquisa, utilizamos como modelo as células-tronco pluripotentes induzidas (iPSC) para recapitular diferentes fases do desenvolvimento embrionário e investigar quais processos celulares e alterações de expressão gênica estariam associados a ACS nestes pacientes. Observamos aumento de expressão dos genes HDAC9 e TWIST1 e diminuição da migração em células de crista neural dos afetados. Também observamos alteração nos processos de diferenciação osteogênica e condrogênica nas células dos afetados. Concluímos que esses achados corroboram a patogenicidade da duplicação em HDAC9 e desta forma explicam a ACS nesta família