Análise das alterações fenotípicas e metabólicas de animais com deleção do gene da neurolisina (EC 3.4.24.16), em modelo de obesidade induzida por dieta.

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Caprioli, Bruna
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Adipose tissue; Expressão gênica; Gene expression; Intracellular peptides; Neurolisina; Neurolysin; Obesidade; Obesity; Peptídeos intracelulares; Tecido adiposo
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42136/tde-13122023-104510/

A endo-oligopeptidase neurolisina (E.C.3.4.24.16; Nln) foi primeiro identificada em membranas sinápticas de cérebro de ratos, como uma peptidase com habilidade para hidrolisar a ligação Pro-Tyr inativando o neuropeptídeo neurotensina. Estudos subsequentes demonstraram que a Nln, recombinante e homogeneamente purificada, tem capacidade para hidrolisar diversos outros neuropeptídeos, incluindo peptídeos opioides, angiotensina e bradicinina. O desenvolvimento de camundongos C57BL6 com supressão da expressão gênica da Nln (Nln-/-), permitiram anteriormente avaliar a relevância biológica dessa enzima no metabolismo energético. O principal papel sugerido para a Nln no metabolismo energético, utilizando os animais Nln-/-, foi de aumentar a sensibilidade à insulina e induzir maior captação de glicose. O mecanismo molecular sugerido para essa característica metabólica dos animais Nln-/- envolve a participação de peptídeos intracelulares (InPeps), que nesses animais podem estar modulando a interação proteína-proteína (IPP) e a expressão de genes relacionados ao controle do metabolismo energético. Neste projeto, os animais Nln-/- e seus respectivos controles (animais C57BL6 selvagens; WT), machos e fêmeas (n = 5-8), foram alimentados com uma dieta padrão (DP) ou hipercalórica suplementada com leite condensado (DH) durante 8 semanas. Todos os animais e procedimentos utilizados foram aprovados pela CEUA ICB, de acordo com as normas estabelecidas pelo CONCEA (protocolo nº 4112010621). Foram avaliados a massa corporal, consumo de ração, calorias e água, a massa dos tecidos adiposos, hepático e muscular, a captação de glicose (TTG), a sensibilidade à insulina (TTI), a histologia do fígado, a expressão de diversos genes no tecido adiposo retroperitoneal, e o peptidoma no tecido adiposo gonadal. Os animais Nln-/- ou WT, machos e fêmeas (n = 5-8), alimentados com DP tiveram semelhantes: a) consumo de ração, calorias e água, b) ganho de massa corporal, c) tolerância à glicose, d) resistência à insulina, e) insulina plasmática, f) massa dos tecidos adiposos gonadal e retroperitoneal, g) massa do músculo estriado esquelético gastrocnêmico, e h) massa do fígado. Quando os animais Nln-/- e WT, machos e fêmeas (n = 5-8), foram alimentados com DH houve distinção na massa corporal, com maior ganho observado para os animais Nln-/- (machos e fêmeas). Os animais WT e Nln-/-, machos e fêmeas, alimentado(a)s com DH, tiveram um menor consumo de ração, comparados aos respectivos controles alimentados com DP. Alimentados com DH os animais Nln-/-, tanto machos como fêmeas, tiveram um consumo de ração maior que os animais WT. Estes dados sugerem que os animais Nln-/- alimentados com DH podem ter ganho maior de massa corpórea em decorrência do maior consumo calórico. Os animais Nln- /- (fêmeas) tiveram maior tolerância à glicose, bem como maior ganho de massa dos tecidos adiposos gonadal e retroperitoneal, bem como redução na massa do fígado (fêmeas e machos) comparados aos respectivos controles WT. Utilizando os animais alimentados com DP como referencial, houve alterações significativas na expressão de genes relacionados ao metabolismo energético do tecido adiposo retroperitoneal, tanto nos animais WT como Nln-/-, quando alimentados com DH. As alterações (tanto aumento como diminuição) nos níveis relativos de peptídeos intracelulares específicos que ocorreram entre animais Nln-/- comparados aos WT, se deram de maneira independente da dieta. Considerando que os animais Nln-/- (machos e fêmeas) apresentaram maior consumo calórico comparados aos animais WT, quando alimentados com DH, é possível sugerir a participação da Nln nos mecanismos relacionados à ingesta alimentar e à regulação do metabolismo de gordura nos tecidos adiposos investigados. A alteração na expressão de genes relacionados ao metabolismo energético e nos níveis relativos de InPeps específicos, sugerem um possível mecanismo molecular para o maior ganho de massa corporal e de tecidos adiposos. No entanto, estudos posteriores serão importantes para que se possa investigar o mecanismo molecular responsável pela maior ingesta e consequente maior ganho de massa corporal dos animais Nln-/-.