Efeito do envelhecimento sobre a homeostase redox e perfil de microRNAs em vesículas extracelulares circulantes : modulação das vias canônicas de sinalização associadas à idade

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Cechinel, Laura Reck
• Orientador(a): Siqueira, Ionara Rodrigues
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Vesículas extracelulares; Envelhecimento; Estresse oxidativo; Peroxidase; MicroRNAs; NADPH oxidases; Cardiomegalia
• Palavras-chave em Inglês: Aging; miRNA; Oxidative stress; Cardiac hypertrophy; Myeloperoxidase
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/215306

O envelhecimento é o principal fator de risco para diversas doenças; nesse contexto, o envolvimento de vesículas extracelulares (VEs) no estresse oxidativo relacionado à idade foi proposto. Além disso, os microRNAs (miRNAs) parecem desempenhar um papel fundamental nas doenças associadas à idade, como nas doenças cardiovasculares. As VEs podem proteger os miRNAs de RNAses endógenas e a internalização dessas vesículas nas células está envolvida na comunicação celular. No entanto, a relação entre o conteúdo das VEs (maquinaria pró e antioxidante e os miRNAs) e doenças relacionadas à idade não foi estudada. Nossa hipótese é de que o processo de envelhecimento seja capaz de impactar a homeostase redox e o perfil de miRNA das VEs circulantes totais e que estes miRNAs tenham alvos nas vias canônicas de estresse oxidativo e relacionadas à idade. O objetivo foi investigar o conteúdo de miRNAs e perfil oxidativo das VEs circulantes totais obtidas de animais adultos jovens e envelhecidos. O plasma foi obtido de ratos Wistar machos (3 e 21 meses de idade) e as VEs totais foram isoladas. Foram avaliados o perfil dos miRNA das VEs circulantes totais para determinar os alvos específicos e também o perfil oxidativo das VEs, através da quantificação das enzimas nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato (NADPH) oxidase 2, mieloperoxidase (MPO), catalase (CAT) e xantina oxidase (XO). As análises de microarray detectaram 48 miRNAs diferentemente expressos entre animais envelhecidos e adultos jovens (p <0,05; fold change de | 1,1 |). Após a aplicação de um filtro conservador, 25 miRNAs maduros foram mapeados. As análises in silico mostraram que a via canônica da hipertrofia cardíaca foi classificada como a principal via regulada positivamente pelos miRNAs diferentemente expressos em animais idosos quando comparados aos adultos jovens. Além disso, outras vias canônicas relevantes, relacionadas à idade, como a endotelina-1 e a ativação intrínseca da protrombina são alvos destes miRNAs. As vias canônicas da ação antioxidante da vitamina C e da produção de espécies reativas em macrófagos também foram identificadas como alvo dos miRNAs no processo de envelhecimento. Ainda, let-7a-5-p foi o principal regulador das vias canônicas e moléculas alvo. Além disso, as VEs circulantes totais obtidas de animais envelhecidos apresentaram níveis significativamente elevados de NADPH oxidase e atividade de MPO; a atividade da catalase foi significativamente reduzida nas VEs circulantes totais dos animais idosos. Os dados aqui apresentados demonstram que o conteúdo de VEs circulantes totais, especificamente NADPH oxidase, MPO e os miRNAs, foram alterados pelo processo de envelhecimento. Nossos resultados indicam que o perfil do miRNA pode ter um papel relevante no envelhecimento cardiovascular e consequentemente nas doenças cardíacas devido ao envolvimento destes com o desequilíbrio redox no processo de envelhecimento.