Modelo animal de autismo induzido por exposição pré-natal ao ácido valproico : estudos comportamentais, moleculares e estratégias terapêuticas

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Hirsch, Mauro Mozael
• Orientador(a): Gottfried, Carmem Juracy Silveira
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Transtorno do espectro autista; Transtorno autístico; Ácido valpróico; Resveratrol; Suramina; MicroRNAs
• Palavras-chave em Inglês: Animal behavior; Suramin; Resveratrol; Purinergic system; PCR; Neuroimmune; ASD
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/185069

O Transtorno do Espectro Autista (TEA), segundo o DSM-5, se enquadra nos Transtornos do Desenvolvimento e é caracterizado por uma díade comportamental: 1) prejuízos na comunicação e interação social e 2) comportamentos repetitivos ou estereotipados. Apesar da etiologia do TEA ser desconhecida, tanto fatores genéticos quanto ambientais já foram associados à desordem, incluindo a utilização de ácido valproico (VPA) durante a gestação. Observando essa relação importante, desenvolveu-se um modelo animal de autismo induzido pela exposição pré-natal ao VPA, o qual já foi amplamente validado em aspectos comportamentais e moleculares. No primeiro capítulo desta tese, utilizamos o modelo animal de autismo obtido através de uma única injeção intraperitoneal de VPA (600mg/kg) no dia E12,5 nas ratas Wistar prenhes e testamos um tratamento pré-natal com resveratrol (RSV), através de injeções subcutâneas (3,6 mg/Kg) administradas nas ratas prenhes nos dias E6,5-E18,5. O tratamento pré-natal com RSV demonstrou ser capaz de prevenir alterações na sociabilidade recíproca, porém não teve impacto nos prejuízos na memória olfativa e comportamentos repetitivos induzidos pelo VPA. No que se refere aos dados de microRNA (miRNA), RSV foi capaz de prevenir a alteração na expressão de miR134-5p, o qual também se observou alterado em pacientes com TEA, juntamente com o miR138-5p, ambos com alvos associados à modulação do citoesqueleto na estrutura de espinhos dendríticos. Em conjunto, esses resultados demonstram que o RSV altera vias importantes no modelo, possivelmente através das suas características antioxidantes e anti-inflamatórias, as quais contrapõem os aspectos inflamatórios do VPA. Este trabalho permitiu o aprimoramento e melhor conhecimento da técnica de RT-qPCR para análise de miRNA, sendo tema do segundo capítulo da presente tese, reunindo diferentes estratégias que auxiliaram a superar potenciais problemas e interferentes no uso dessa técnica. Finalmente, no terceiro capítulo, utilizamos o modelo VPA para avaliar o efeito do tratamento pós-natal com suramina, através de uma única injeção subcutânea (20 mg/kg) administrada nos filhotes machos na idade P30. Este tratamento foi capaz de reverter alterações de sociabilidade, novidade social e comportamento do tipo ansioso, enquanto os prejuízos na sociabilidade recíproca, comportamento exploratório, estereotipia e processamento sensorial não foram revertidos por esse tratamento. Nos dados moleculares, a suramina não foi capaz de reverter o aumento de expressão nos receptores purinérgicos P2X4 (hipocampo e córtex pré-frontal medial) e P2Y2 (hipocampo), porém reverteu o aumento de IL-6 promovido pelo VPA. Assim, possivelmente a modulação comportamental associada à suramina parece não estar associada a interações específicas nos receptores purinérgicos, mas sim com uma modificação neuroimune através da interleucina pró-inflamatória IL-6, demonstrando a importância do sistema imunológico na fisiopatologia do TEA. De forma geral, a tese contribuiu para elucidar mecanismos envolvidos no desenvolvimento das características do tipo autista, demonstrando o papel relevante das alterações neuroimunes e da modulação de alvos por miRNA, as quais, em conjunto, podem contribuir para o desenvolvimento de métodos diagnósticos e adequação de estratégias farmacológicas voltados ao TEA. Palavras-chave: Comportamento animal, microRNA, neuroimune, PCR, resveratrol, sistema purinérgico, suramina, transtorno do espectro autista.