Produção de citocinas inflamatórias e indução da transição epitelial-mesenquimal de células amnióticas no cenário de infecção polimicrobiana

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Silva, Mariana de Castro
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Células amnióticas epiteliais; Lactobacilos; Micoplasmas genitais; Desfecho gestacional adverso; Infecção polibacteriana; Immortalized amnion epithelial cells; Lactobacilli; Genital mycoplasmas; Pregnancy outcome; Polybacterial infection
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/236564

Introdução: O parto pré-termo espontâneo (PP) é considerado um dos principais problemas da clínica obstétrica e tem como uma das principais causas associada a infecção polibacteriana e consequente inflamação dos tecidos da interface materno-fetal. Esse desfecho gestacional desfavorável resulta da combinação de vários mecanismos, incluindo a elevada produção de mediadores inflamatórios e a senescência celular. O objetivo desse estudo foi avaliar a produção e cinética de mediadores inflamatórios em modelos in vitro de infecção polimicrobiana de células amnióticas na presença de diferentes espécies de lactobacilos, além de avaliar fatores indutores da transição epitelial-mesenquimal em células amnióticas. Metodologia: Células amnióticas epiteliais imortalizadas foram cultivadas em modelos in vitro e submetidas a diferentes estímulos compostos por espécies bacterianas comumente identificadas em gestações complicadas por PP. Os sobrenadantes da cultura foram coletados em cinco momentos diferentes: 0h, 6h, 12h, 18h e 24h. As Interleucinas (IL) -6, IL-8, IL-10, IL-13, fator estimulador de colônias de granulócitos e macrófagos (GM-CSF) e fator de necrose tumoral α (TNF-α) foram mensurados empregando-se ensaio imunoenzimático (ELISA) e a análise morfológica foi realizada por meio de análise de cell shape index. Resultados: A produção de citocinas pró-inflamatórias foi maior nos grupos estimulados com Lactobacillus iners em combinações com Mycoplasma hominis e diferentes bactérias. A resposta anti-inflamatória foi maior nos grupos de bactérias anaeróbias estimulados junto com L. crispatus. A transição epitelial-mesenquimal foi significativamente maior no grupo estimulado com L. iners e M. hominis, assim como em combinação com Fusobacterium nucleatum, depois de 24h de estímulo. Esse aumento na transição epitelial-mesenquimal não foi observado quando as células eram tratadas com LPS, mas houve um aumento significativo da quantificação de células mesenquimais quando o estímulo era inflamatório, sendo esse tempo e dose dependente. Conclusão: O cenário induzido por estimulação, das células epiteliais amnióticas, com bactérias Gram-variáveis, na presença de L. iners, apresentou maiores níveis de citocinas pró-inflamatórias, assim como a transição epitelial-mesenquimal esteve associada à presença de mediador inflamatório (TNFα) e às combinações específicas de bactérias.