Estudo da miotonia hereditária em suínos

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Araújo, César Erineudo Tavares de
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Doença muscular; Canalopatia; Canal de cloro; Doença hereditária; Deleção; voluntary muscle disorder; channelopathy; chloride channel; hereditary disease; deletion
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/155953

A principal causa de miotonia não distrófica hereditária ocorre devido à mutações no gene CLCN1, codificante para a proteína CLC1 que forma o canal iônico seletivo para o íon cloreto predominante no tecido muscular esquelético. Mutações no gene CLCN1 foram descritas como causadoras de miotomia hereditária em humanos e em várias espécies animais. Não existe descrição de miotonia hereditária na espécie suína. O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização clínica e molecular de uma forma de miotonia hereditária em suínos. A hipótese desse estudo foi que animais com sinais clínicos compatíveis apresentavam a miotonia hereditária. Esses animais foram avaliados sob aspectos clínicos, eletromiográficos, histopatológicos e moleculares. Os sinais clínicos verificados foram hipertrofia e rigidez musculares, miotonia com startle response formação de dimples e fenômeno warm-up evidentes. Não foi constatada distrofia muscular ao exame histopatológico. Ao exame eletromiográfico foram demonstradas descargas miotônicas clássicas com formação de som característico diver bomb. A nível molecular foi verificada a ausência dos nucleotídeos referentes aos éxons 15 e 16 utilizando amostras de cDNA dos animais afetados. No DNA genômico foi encontrada uma grande deleção de 4165pb (g. NC_010460.4 del 6912538_6916702) na região do gene CLCN1. Análises de expressão relativa demonstraram níveis de expressão em tecido muscular de animais wild type para um transcrito associado a miotonia hereditária em homozigotos afetados. Foi realizada modelagem da proteína CLC1 suína a partir da sequência de animais wild type para a deleção. Testes moleculares foram padronizados para serem utilizados como ferramenta diagnóstica dessa enfermidade e também para a orientação dos acasalamentos nesta espécie. Esta é a primeira descrição de uma deleção genômica na região do gene CLCN1 causadora de miotonia hereditária e da expressão de um transcrito alternativo para o gene CLCN1. A caracterização de uma canalopatia de canal de cloro decorrente de uma deleção no genoma nessa espécie animal poderá contribuir para estudos comparativos dessa enfermidade entre várias espécies, inclusive a humana.