Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2018 |
| Autor(a) principal: |
Zanatta, Ana Paula Kwiatkowski Hamerski |
| Orientador(a): |
Dal Belo, Cháriston André
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| Banca de defesa: |
Piovezan, Ângela Regina
,
Franco, Jeferson Luis |
| Tipo de documento: |
Dissertação
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal do Pampa
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| Programa de Pós-Graduação: |
Mestrado Acadêmico em Ciências Biológicas
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| Departamento: |
Campus São Gabriel
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| País: |
Brasil
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| Palavras-chave em Português: |
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| Área do conhecimento CNPq: |
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| Link de acesso: |
http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/4565
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Resumo: |
Atualmente, há urgência do amento da produção mundial de alimentos, o que torna o uso de pesticidas uma necessidade recorrente, mesmo que esses compostos possuam uma série de efeitos indesejados sobre o meio ambiente em geral. Portanto, o desenvolvimento de novos compostos naturais com potencial entomotóxico torna-se não apenas uma alternativa. Diversas moléculas naturais com potencial enomotóxico possuem como alvo principal canais iônicos, destacando-se o canal de sódio voltagem dependente (Nav). Nav é um complexo proteico transmembrana, que possui um poro preenchido com água, onde íons de sódio difundem-se através do gradiente eletroquímico. A diversidade farmacológica dos Navs é vasta e observada através da multiplicidade de substâncias tóxicas, específicas para esses canais. Assim, a investigação de interação de moléculas naturais com esse canal é pertinente. As ureases são metaloenzimas que hidrolizam a ureia em amônia. Esses compostos são sintetizados por diversos organismos e têm sido caracterizados como inseticidas naturais. A atividade entomotóxica da Jack Bean Urease (JBU) é diretamente correlacionada com a liberação de um peptídeo tóxico chamado Jaburetox (Jbtx), derivado da clivagem realizada por catepsinas no sistema digestório dos insetos. Jbtx apresenta efeitos fungitóxicos, entomotóxicos, neurotóxicos antimicrobiano e seu modo de ação ainda aguarda elucidação. O objetivo desse trabalho foi investigar o mecanismo de neurotoxicidade induzido pelo peptídeo tóxico Jaburetox, sobre o sistema nervoso central e periférico de Nauphoeta cinerea e Periplaneta americana, usando diferentes técnicas eletrofisiológicas. Foram utilizados machos adultos das espécies Nauphoeta cinerea e Periplaneta americana, criados em insetário em condições laboratoriais. Foram realizados registros ex situ dos potenciais de ação compostos de perna de Nauphoeta cinerea, além de registros da atividade espontânea de neurônios DUM pertencentes ao gânglio abdominal terminal e dos potenciais de ação através do modo voltage/current clamp a partir da técnica de Double Oil Gap em cordão nervoso ventral de Periplaneta americana. Os dados foram expressos como média da porcentagem ± S.E.M. Os grupos experimentais foram analisados por ANOVA one-way / two-way ou regressão, seguido pelo teste de Dunnet como post hoc. O efeito de Jbtx (16 e 32 μg / g animal) sobre os SNCAPs de perna de N. cinerea foi caracterizado por diminuição significativa tempo e dose dependente no número de eventos (n = 10). O efeito do Jbtx (20μg/300μl) sobre a atividade espontânea de células DUM foi de diminuição progressiva na frequência dos potenciais, após 25 minutos de registro (n = 3). Após 40 minutos, houve a completa inativação da atividade espontânea de células DUM. O 10 tratamento com fentolamina (5μg / 300μl) induziu um retardo no efeito do Jbtx (20μg / 300μl) sobre os potenciais espontâneos das células DUM (8 ± 0.34% spikes / 200ms até 40 min, inibição completa após 55 min (n = 3 , p <0,05). A partir da técnica Double Oil Gap, os registros de voltage e current clamp demonstram que o Jbtx (20μg / 300μl) promove a diminuição dos picos de Na+ , a partir dos 25 minutos de registro. A hiperpolarização artificial dos potenciais de membrana em repouso provocou uma recuperação para 76 ± 3% e 73 ± 3% da amplitude média dos registros de current e voltage clamp, respectivamente. A diminuição do número de eventos em SNCAP é coerente com o bloqueio neuromuscular demonstrado anteriormente pelo nosso grupo e onde os registros de voltage e current clamp revelam que o Jbtx afetam as correntes de sódio. O retardamento do silenciamento de células DUM, induzido pela aplicação de fentolamina, sugere que o Jbtx está, de uma forma ambígua, modulando a liberação de octopamina. Os resultados sugerem que a interação da Jbtx com Navs promove alterações fisiológicas responsáveis pela modulação comportamental, observada em trabalhos anteriores. |
