Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2019 |
| Autor(a) principal: |
Costa, Laura Santos Martins
 |
| Orientador(a): |
Santos, Marcelo de Oliveira
|
| Banca de defesa: |
Ramada, Marcelo Henrique Soller
,
Vasconcelos, Eveline Gomes
,
Pereira, Jorge Fernando
,
Souza, Saulo Marçal de
|
| Tipo de documento: |
Dissertação
|
| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF)
|
| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-graduação em Ciências Biológicas: Imunologia e Doenças Infecto-Parasitárias/Genética e Biotecnologia
|
| Departamento: |
ICB – Instituto de Ciências Biológicas
|
| País: |
Brasil
|
| Palavras-chave em Português: |
|
| Área do conhecimento CNPq: |
|
| Link de acesso: |
https://repositorio.ufjf.br/jspui/handle/ufjf/10228
|
Resumo: |
O gene sintético DomB, isolado da fração da apirase de batata (Solanum tuberosum), apresenta atividade antigênica em animais e confere resistência a plantas de fumo (Nicotiana benthamiana) à infecção bacteriana por Pectobacterium atrosepticum. No presente trabalho, propusemos a análise proteica diferencial em plantas de Nicotiana benthamiana geneticamente modificadas com o gene sintético g2S2-6His-DomB por nanoUPLC-MSE. Para esse fim, comparamos o conteúdo proteico da progênie hemizigótica R0 de N. benthamiana modificadas geneticamente com o gene ao conteúdo proteico de N. benthamiana selvagem, e desses grupos desafiados com P. atrosepticum. Além disso, propusemos a avaliação da atividade do mesmo gene em S. tuberosum via agroinfiltração. A partir da análise das proteínas tripsinizadas, os resultados sugerem que ocorre a produção de proteínas possivelmente ligadas à sinalização de defesa quando as plantas são submetidas à um desafio com uma fitobactéria, porém devido ao baixo número de identificações, temos como perspectiva repetir os experimentos com um maior número de réplicas. As análises preliminares com a cultivar comercial Solanum tuberosum cv. Asterix da expressão transiente do mesmo gene sintético pelo método de infiltração via Agrobacterium cepa 3101 contendo o plasmídeo pk7WG2D-gfp-g2S2-6His-DomB, comparada a outro grupo onde houve a co-infiltração com Agrobacterium EHA101 contendo TCV-CP, que funciona como um supressor do silenciamento de genes pós-transcricionais, apresentou resultado promissor. Após o quinto dia de agroinfiltração, as folhas de S. tuberosum com 5 - 8 semanas foram desafiadas com a bactéria fitopatogênica e observadas por mais sete dias. Ao final desse período observamos que houve uma reação de hipersensibilidade no local de aplicação, mas que tal processo não se expandiu por todo o tecido foliar. O imunoensaio dot-blot sugere a expressão do polipeptídeo p2S26His-DomB nas folhas infiltradas com o plasmídeo e com o TCV-CP. Buscando obter cultivares resistentes a um problema nas culturas de batata, que é a infecção por P. atrosepticum, o projeto pode potencialmente adicionar informações sobre os mecanismos de defesa das plantas modificadas geneticamente com o gene g2S2-6His-DomB e propiciar uma melhor ação na produção de plantas transgênicas resistentes a fitopatógenos com o gene sintético DomB. |
