As variantes de splicing osteopontina-4 e osteopontina-5 são expressas em diversos tumores

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Silva, Gabriela Ribeiro
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Osteopontina; Variantes de splicing; OPN4; OPN5; Linhagens celulares tumorais; Isoformas de proteínas; Linhagem celular tumoral; Osteopontin; Splice variants; Cancer cell lines
• Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/23602

A osteopontina (OPN) é uma proteína amplamente expressa no organismo, apresentando funções fisiopatológicas. No câncer, a OPN apresenta-se superexpressa tanto no tecido tumoral, quanto nas células do microambiente tumoral. O gene codificador da OPN apresenta splicing alternativo, gerando pelo três isoformas mais bem caracterizadas, denominadas de osteopontina-a (OPNa), osteopontina-b (OPNb) e osteopontina-c (OPNc), as quais diferem em expressão e papel funcional, e outras duas mais recentemente descritas em amostras de carcinoma esofágico, denominadas de osteopontina-4 (OPN4) e a osteopontina-5 (OPN5). Entre as variantes de splicing da osteopontina (OPN-VS), o perfil de expressão e o papel funcional das isoformas OPN4 e da OPN5 em tipos distintos de câncer ainda não foram investigados. Neste trabalho objetivamos investigar seus perfis de expressão em diversas linhagens de células tumorais, além de compará-los em relação às três OPN-VS descritas anteriormente, a OPNa, a OPNb e a OPNc. O RNA total das linhagens celulares tumorais, incluindo as de próstata (PC3 e DU145), ovário (A2780), mama (MCF-7 e MDA-MB-231), colorretal (Caco-2, HT-29 e HCT-116), tireoide (TT, TPC1 e 8505c), leucemia linfoblástica aguda de células B (RS4;11) e pulmão (A549 e NCI-H460) foram extraídos, seguido de síntese de cDNA. A análise do perfil de expressão dos transcritos das OPN-VS por PCR convencional ou PCR em tempo real foi realizada utilizando oligonucleotídeos específicos das OPN-VS e dos genes constitutivos GAPDH e β-actina. Os transcritos da OPN4 e OPN5 apresentaram coexpressão na maioria das linhagens celulares testadas. A OPN4 se mostrou expressa em níveis semelhantes ou superiores em relação à OPN5. Além disso, a OPN4 também é expressa em níveis semelhantes à OPNa ou à OPNb. A expressão da OPN5 também é variável em relação às demais OPN-SV, apresentando expressão em níveis semelhantes ou superiores em relação à OPNc, dependendo da linhagem celular testada. A OPN4 e a OPN5 também são superexpressas na maioria das amostras clínicas analisadas em comparação aos tecidos não tumorais correspondentes. Uma vez que a OPN4 e a OPN5 são diferencialmente expressas e também evidenciam padrões de expressão tumor-específicos, hipotetizamos que, de forma semelhante às demais OPN-VS, estas variantes possivelmente também contribuem para aspectos-chave da progressão tumoral, devendo ser funcionalmente investigadas em distintos modelos tumorais