Quimiodiversidade de fungos endofíticos associado a estresse oxidativo em larvas de Aedes aegypti

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Costa, Maria Beatriz Silva
• Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/6170763502555705
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal do Amazonas; Instituto de Ciências Exatas e Tecnologia - Itacoatiara; Brasil; UFAM; Programa de Pós-graduação em Ciência e Tecnologia para Recursos Amazônicos
• Palavras-chave em Português: Citotoxidade; Quimiodiversidade; Xanthomonas; Aedes aegypti; Vírus da dengue; CIÊNCIAS AGRÁRIAS; Dengue; TBARS; Carbonila
• Link de acesso: https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/7724

O mosquito Aedes aegypti é o principal vetor do vírus da dengue, dengue hemorrágica, chikungunya e do zika vírus, que vem causando um grave problema de saúde pública mundial. Atualmente, o controle do Ae. aegypti se realiza com larvicidas sintéticos, no entanto, os mosquitos têm se tornado altamente resistentes a eles e isto faz com que sua erradicação seja mais difícil. O surgimento de mosquitos resistentes a inseticidas reforça o interesse da busca de novos produtos eficazes contra esses mosquitos adultos e no seu estado larval. Dessa forma, o objetivo deste projeto foi avaliar a quimiodiversidade encontrada nos fungos endofiticos isolados de Passovia stelis quanto ao seu potencial larvicida e de compreender os possíveis mecanismos entomotóxicos induzidos. Assim, para alcançar os objetivos delineados, 104 fungos endofíticos isolados em estudos anteriores passaram por reativação, onde apenas 6 apresentaram viabilidade. Cada um dos seis fungos foi cultivado em meio líquido de batata-dextrose, após o crescimento micelar, o caldo foi separado e particionado com acetato de etila, fornecendo os extratos brutos após a evaporação do solvente. Os extratos brutos obtidos (Ph, FAT07, FAT46, FAT49, FAT50 e CAT20) foram submetidos à testes preliminares em células de fibroblastos de pulmão humano (MRC-5) para análise de citotoxicidade pelo método do Alamar Blue e determinação de níveis de espécies reativas de oxigênio usando método da diclorofluoresceína. Os extratos que foram citotóxicos e apresentaram produção de espécies reativas de oxigênio foram submetidos ao teste de potencial larvicida frente as larvas de Ae. aegypti (ensaio bioseletivo e de dose). As larvas que morreram quando expostas ao extrato analisado foram submetidas a quantificação do dano oxidativo causado a proteínas e lipídios por meio do ensaio de substâncias reativas de ácido tiobarbitúrico e quantificação de teor de carbonila, respectivamente. De acordo com os resultados obtidos as amostras Ph, CAT 20, FAT 49, FAT 46 e FAT 50 não apresentaram citotoxicidade, enquanto a amostra FAT 07 foi citotóxica. Todos os extratos testados frente as células MRC-5 são produtores de espécies reativas de oxigênio. O extrato FAT07 apresentou atividade larvicida com CL50 igual a 264,456 ppm e CL90 igual a 364,307 ppm, sendo considerado ativo. Suplementarmente, supõe-se que as larvas ao serem submetidas ao extrato FAT07 morrem por dano oxidativo a proteínas e lipídios. O extrato FAT07 foi fracionado, e três substâncias foram isoladas, estando em processo de identificação por Ressonância Magnética Nuclear e Espectrometria de Massas. Adicionalmente, foi realizado ensaio biológio para atividade antibacteriana contra Xanthomonas citri subsp. citri.