Caracterização físico-química e atividade imunomoduladora de polissacarídeos de Lentinus strigosus (Schwein.) Fr., cultivado sob fermentação submersa
| Ano de defesa: | 2022 |
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| Autor(a) principal: | |
| Outros Autores: | , |
| Orientador(a): | |
| Banca de defesa: | |
| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal do Amazonas
Instituto de Ciências Biológicas Brasil UFAM Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia |
| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/9088 |
Resumo: | Neste trabalho foram estudadas frações polissacarídicas extraídas da biomassa micelial – obtida via fermentação submersa – da linhagem de origem Amazônica do cogumelo comestível Lentinus strigosus. Após a extração e purificação, as frações homogêneas obtidas, aquosa (LSW) e alcalina (LSK) foram caracterizadas quanto à estrutura, propriedades físico-químicas e reológicas, bem como efeitos imunomoduladores e adesivos em macrófagos. Ambos os polissacarídeos apresentaram constituição majoritária de glucose, com traços de galactose, manose, arabinose e xilose. Não foram detectados ácidos urônicos. Análises de ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H, 13C e DEPT-135 sugerem que a fração LSW contenha unidades de →6)-β-D-Glcp-(1→, →4)-α-D-Glcp-(1→ e →6)-α-D-Galp-(1→ como componentes majoritários. Já a fração alcalina (LSK) apresentou unidades de β-D-Glcp-(1→, →3)-β-D-Glcp-(1→ e →3,6)-β-D-Glcp-(1→. Análises por espalhamento dinâmico de luz (DLS) mostraram um diâmetro médio de 609,37 nm para as partículas polissacarídicas da fração LSW, e 301,17 nm para LSK, ambas com dispersão homogênea de tamanhos. O potencial zeta das duas frações foi similar, em torno de -6,58 mV para LSW e -5,47 mV para LSK, portanto com densidade de cargas elétricas superficiais próxima da neutralidade, porém ligeiramente negativas. Propriedades reológicas das soluções de polissacarídeos foram avaliadas em termos do modulo de armazenamento elástico (G’), modulo de perda viscosa (G”) e viscosidade complexa (η*), indicando um caráter de gel fraco para LSW e de líquido viscoso para LSK, não exibindo histerese térmica significativa. Ambas as frações apresentaram significativa atividade imunomoduladora em macrófagos murinos, estimada através da dosagem de citocinas por ELISA. Em células RAW-264.7, LSW estimulou a produção de IL-6 e TNF-α, inibindo a produção de IL-10, enquanto LSK não apresentou indução ou inibição de tais citocinas. Já em células J774.1, ambas frações apresentaram atividade semelhante, ativando a produção de TNF α, inibindo IL-10 e sem influenciar os níveis de IL-6. Microesferas de poliestireno revestidas com os polissacarídeos foram manipuladas com pinças ópticas (OT) para interagir com macrófagos vivos em cultura, apresentando tempo característico necessário para adesão à superfície celular bastante inferior ao controle, em torno de 13,38 s (LSW) e 13,94 s (LSK), sugerindo que tais polissacarídeos são rapidamente reconhecidos pelos macrófagos. Diante dos resultados, os polissacarídeos de L. strigosus apresentam propriedades distintas quando obtidos via extração aquosa e alcalina, ambos com atividade imunoestimuladora in vitro, verificada através de uma provável resposta inflamatória e rápida adesão/reconhecimento por macrófagos. Tais resultados vêm a contribuir com o conhecimento sobre o potencial de L. strigosus da Amazônia como cogumelo produtor de biomoléculas com benefícios à saúde e propriedades nutracêuticas ou funcionais, com foco na modulação imune. Como perspectivas futuras, estudos mais aprofundados de caracterização estrutural, mecanismos imunológicos ativados e o screening de outras atividades biológicas desses polímeros são recomendados, assim como a otimização e escalonamento de produção. |