Culturas de raízes de Cleome dendroides Schult & Schult f. e caracterização química de materiais obtidos in vitro e coletados a campo
| Ano de defesa: | 2017 |
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| Autor(a) principal: | |
| Orientador(a): | |
| Banca de defesa: | |
| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Universidade do Estado do Rio de Janeiro
Centro Biomédico::Instituto de Biologia Roberto Alcantara Gomes BR UERJ Programa de Pós-Graduação em Biologia Vegetal |
| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/7967 |
Resumo: | As plantas são importante fonte de moléculas bioativas cuja síntese normalmente ocorre em baixas concentrações. Desta forma, para a exploração comercial destas moléculas, há a necessidade do uso de grandes quantidades de material botânico, o que, muitas vezes, torna o processo pouco eficiente, além de comprometer a existência das espécies. Esta questão pode ser minimizada pela aplicação das técnicas de cultura de tecidos vegetais, pelas quais é possível a produção in vitro de metabólitos de interesse. Dentre essas técnicas, destacam-se as culturas de raízes, que apresentam grande potencial para a produção de moléculas bioativas, principalmente por serem culturas constituídas de células diferenciadas. Desta forma, o presente trabalho teve por objetivos: 1) avaliar o efeito de diferentes fatores físicos e químicos sobre o crescimento de culturas de raízes e 2) realizar a caracterização química de Cleome dendroides, espécie endêmica da Mata Atlântica. Para tal, plantas propagadas in vitro foram utilizadas como fontes de explantes radiculares. Os fatores avaliados ao longo do trabalho foram: tamanho dos explantes (0,5; 1,0; 1,5 cm), luminosidade (escuro; fotoperíodo 16h luz/8h escuro), concentração de sais minerais totais do meio de cultura MS (MS1/4; MS1/2; MS; 2MS), concentração de sacarose (10; 20; 30; 50; 70; 90 g.L-1), valor inicial de pH do meio de cultura (5,0; 5,8; 6,0; 6,5; 7,2) e velocidade das mesas giratórias orbitais (60; 110; 130; 160 rpm). Os experimentos foram realizados em meio sem suplementação hormonal (MS0) ou na presença de 3,0 mg.L-1 de AIB. O acúmulo de biomassa foi quantificado pela aferição do peso de matéria seca após 45 dias em cultivo. Com relação à caracterização química, foram avaliados materiais produzidos in vitro (plantas e culturas de raízes) e in vivo (plantas coletadas a campo), considerando duas metodologias para o preparo dos extratos (maceração dinâmica e maceração acelerada por ultrassom), sendo as análises realizadas por técnicas cromatográficas. Os resultados mostraram que o meio com suplementação de AIB acarretou em maior produção de raízes, quando comparado ao meio MS0. O tamanho dos explantes influenciou a proliferação de raízes apenas para as culturas mantidas no escuro. Entretanto, a presença de luz induziu uma maior capacidade de multiplicação das raízes. Desta forma, as culturas passaram a ser realizadas com explantes de 0,5 cm, em meio suplementado com AIB e mantidas na presença de luz. A redução na concentração de sais minerais do meio influenciou de forma positiva o crescimento das culturas, com maior acúmulo de biomassa em meio MS1/4. O mesmo foi verificado quando a concentração de sacarose foi elevada para 70 g.L-1. A elevação do valor de pH inicial do meio de cultura para 6,5, assim como a manutenção das culturas em mesas giratórias numa velocidade de 130 rpm, também favoreceram a multiplicação das raízes. O emprego das melhores condições descritas acima em um único protocolo de cultura se mostrou uma estratégia eficiente para a manutenção da capacidade de multiplicação das raízes de C. dendroides ao longo do tempo em cultivo. Com relação à caracterização química, a extração por maceração dinâmica se mostrou mais eficiente para a maior parte dos extratos avaliados, tanto no que se refere à variedade de substâncias extraídas, quanto na concentração relativa das mesmas. As análises em CCD sugeriram a presença de substâncias das classes das saponinas e flavonoides. As análises em CLAE-DAD-UV mostraram, principalmente, a presença de flavonoides nos diferentes materiais avaliados. Os resultados alcançados demonstram o êxito do protocolo definido para a produção de raízes in vitro de C. dendroides empregando plantas propagadas in vitro como fonte de explantes, além de fornecer informações quanto às suas propriedades químicas que poderão servir de base para estudos do potencial medicinal da espécie |