Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2017 |
| Autor(a) principal: |
SILVA, KATIANE QUEIROZ DA |
| Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Estadual do Ceará
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: |
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| Link de acesso: |
https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=82406
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Resumo: |
<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">RESUMO</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Os biofármacos representam um mercado promissor, uma vez que estão sendo desenvolvidos por grandes indústrias farmacêuticas mundiais; a maioria delas está localizada nos Estados Unidos da América (EUA), Europa e Japão. Esses medicamentos podem ser sintetizados utilizando diferentes sistemas de produção tais como o sistema transiente para a expressão das proteínas lisozima e lactoferrina humanas recombinantes no leite de cabras não transgênicas. O objetivo deste estudo foi utilizar a plataforma adenoviral para expressar transientemente a proteína lactoferrina humana recombinante (rhLF) na glândula mamária de cabra não transgênica e testar a citotoxicidade do leite (LT-rhLF) e do soro (ST-rhLF) produzidos pelo sistema em células das linhagens cancerígenas HCT116, PC-3, SF295 e não cancerígena L929. Neste estudo, a expressão in vitro da rhLF se deu através da construção e ampliação do sistema adenoviral final (rAV-hLF) nas células HEK293 e MAC-T. Para a expressão in vivo da rhLF, injetou-se 108 GTU/mL e 109 GTU/mL do rAV-hLF, diretamente nos dutos das glândulas mamárias direita e esquerda, respectivamente, de uma cabra não transgênica. A citotoxicidade do leite e do soro contendo rhLF foi avaliada pelo teste de MTT, nas concentrações de 6, 3, 1,5 e 0,75 uM de rhLF adicionados nas células cancerígenas, HCT116, PC-3, SF295 e não cancerígena L929. A expressão de rhLF foi observada após 12 h de transfecção em 30% das células HEK-293 e identificada após o mesmo período nas células MAC-T. Os leites de ambas as concentrações de rAV-hLF tiveram pico de expressão de rhLF no quarto dia após a inoculação, com concentração máxima de rhLF de 966,5 mg/L na mama esquerda, onde a rhLF foi identificada durante nove dias de lactação. O aumento das concentrações de rhLF no LT-rhLF e no ST-rhLF aumentou a taxa de inibição em todas as células tumorais. A citotoxicidade foi diferenciada para as células HCT116, PC-3, SF295 e na presença ou ausência de constituintes do leite. A maior citotoxicidade ocorreu na HCT116, na presença de 6 μM da rhLF no leite e no soro transgênico. As células L929 se mantiveram dentro dos padrões normais de inibição. A plataforma de expressão transiente da rhLF no leite de caprino não transgênico foi eficiente para avaliação do potencial anticancerígeno da rhLF em linhagens de células tumorais HCT116, PC-3, SF295 e não tumorais L929. O estudo anterior, que serviu de base para a expressão e teste do leite contendo rhLF, investigou o efeito do leite de cabras expressando lisozima transgênica (hLF) na morfologia intestinal e os níveis de citoquinas pró e anti-inflamatórias. Os ratos foram divididos e alimentados durante 21 dias com leite de caprina transgênico contendo hLZ (224 μg/ mL) e leite de uma cabra não transgênica (controle). Avaliaram-se o ganho de peso, o tamanho de vilosidades do jejuno e a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">9</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">expressão de ARNm de IL-6, TNF-α, TGF-β, occludina e ZO-1 utilizando PCR quantitativa em tempo real (qPCR). O leite transgênico aumentou o ganho de peso e o tamanho das vilosidades intestinais nos animais tratados, Além disso, este tratamento reduziu a expressão de ARNm de IL-6, TNF-a, occludina e ZO-1 e aumentou a expressão de TGF-p. Estes resultados sugerem que o leite de cabras expressando lisozima transgênica protegeu a morfometria intestinal e os níveis de citocinas inflamatórias equilibradas, o que levou ao crescimento do animal.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Biofármacos. Lactoferrina. Adenovírus. Leite de Cabra. Câncer.</span></font></div> |
