CULTIVO IN VITRO DE FOLÍCULOS PRÉ-ANTRAIS MURINOS E CAPRINOS: EFEITO DO MODELO ANIMAL DE ESTUDO E DO HORMÔNIO ANTI-MÜLLERIANO

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: ROCHA, REBECA MAGALHÃES PEDROSA
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Ovário de mamífero
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=87899

<div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Os objetivos do presente trabalho foram: 1) avaliar a eficiência de dois meios de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivo desenvolvidos para camundongos e caprinos sobre o cultivo in vitro de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">folículos pré-antrais isolados de ambas as espécies; 2) investigar a expressão do</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">hormônio anti-mülleriano (AMH) e seu receptor do tipo II (AMHRII) em ovários</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">caprinos e verificar os efeitos do AMH e do kit ligand (KL) sobre os parâmetros de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">sobrevivência, ativação e crescimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados in</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">situ; 3) avaliar os efeitos do AMH, associado ou não ao hormônio folículo estimulante</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(FSH), sobre a sobrevivência, crescimento folicular e competência para a retomada da</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">meiose de oócitos oriundos de folículos secundários caprinos isolados cultivados in</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">vitro, bem como avaliar os níveis de secreção de esteroides e de mRNA para o AMH,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">AMHRII, receptor de FSH (FSHR), enzimas esteroidogênicas (CYP19A1, CYP17,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">HSD3B), e Myc. Para o cultivo in situ, fragmentos de córtex ovariano foram</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivados in vitro por 1 ou 7 dias em &#945;-MEM+ sozinho ou adicionado de AMH ou</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">KL. Para o cultivo de folículos isolados, folículos secundários foram isolados por</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">microdissecção e cultivados por 12 (camundongo) ou 18 (caprino) dias em &#945;-MEM+.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Para a comparação entre os meios desenvolvidos para camundongos e caprinos, o</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">meio de cultivo foi suplementado com FSH recombinante humano (meio</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">camundongo) ou com FSH recombinante bovino associado ao hormônio do</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">crescimento (meio caprino). Já a comparação entre os efeitos do AMH associado ou</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">não ao FSH durante o cultivo de folículos caprinos isolados, o &#945;-MEM+ foi</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">suplementado ou não com AMH e/ou FSH adicionados ou não de forma sequencial.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Os resultados demonstraram que, após a maturação in vitro, um alto (P &lt; 0,05)</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">número de oócitos retomaram a meiose no meio murino em ambas as espécies</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">estudadas. Em contraste, somente na espécie caprina a produção de estradiol foi</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">significativamente superior quando o meio caprino foi usado. Após 7 dias de cultivo</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">in situ, a adição de AMH manteve o percentual de folículos em desenvolvimento,</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">similar ao encontrado no controle não-cultivado. Além disso, o AMH e o seu receptor</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">foram localizados em oócitos e células da granulosa desde folículos primordiais até</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">folículos antrais. Quanto ao cultivo de folículos caprinos isolados, os tratamentos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">AMH, AMH + FSH e AMH/FSH reduziram (P &lt; 0,05) a taxa de crescimento quando</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">comparados ao controle cultivado (&#945;-MEM+) e ao FSH sozinho. No entanto, as</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">condições de cultivo testadas não afetaram as taxas de retomada da meiose e a</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">produção de esteroides (P &gt; 0,05). A expressão de mRNA para AMHRII foi reduzida</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">(P &lt; 0,05) na presença do FSH em comparação ao controle não-cultivado e os</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">tratamentos que continham AMH e AMH/FSH. Em conclusão, folículos pré-antrais</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">murinos e caprinos cultivados sob as mesmas condições de cultivo in vitro respondem</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">diferentemente. Além disso, o AMH inibe a ativação de folículos primordiais caprinos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">cultivados em fragmentos de tecido ovariano e reduz a taxa de crescimento de</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">folículos secundários caprinos isolados sem afetar a sobrevivência e a habilidade dos</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">oócitos de retomarem a meiose.</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">Palavras-chave: Caprino. Murino. Folículos pré-antrais. AMH. FSH. Cultivo in</span></font></div><div style=""><font face="Arial, Verdana"><span style="font-size: 13.3333px;">vitro.</span></font></div>