Criopreservação e morfometria dos espermatozoides epididimários de gato doméstico

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Barbosa, Brenna de Sousa
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Ciências veterinárias; Espermatozoides - Criopreservação; Gato Domestico
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=104486

<div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);">Estudos referentes à criogenia dos espermatozoides epididimários de gato doméstico vem </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">despertando crescente interesse no campo científico. Contudo, a criopreservação destes </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">espermatozoides ainda apresenta resultados variáveis. Este fato, fomenta a investigação de</span></div><div><span style="mso-spacerun:'yes';font-size:12pt;font-family:Times New Roman;color:rgb(0,0,0);">novos diluentes que atendam melhor as necessidades do gameta; como também estudos sobre </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">o efeito das etapas da congelação-descongelação sobre a célula. Ademais, o emprego da </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">morfometria na avaliação do espermatozoide felino pode ajudar a inferir melhor sobre a </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">qualidade destes pós-descongelação. Assim, o trabalho objetivou avaliar a qualidade pós-</span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">descongelação dos espermatozoides recuperados e criopreservados com o diluente ACP-117c </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">(Experimento 1); submetidos a diferentes tempos de equilíbrio da glicerolização (Experimento </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">2); além de determinar o efeito das etapas da congelação-descongelação na qualidade seminal; </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">e caracterizar os espermatozoides felinos quanto à morfometria (Experimento 3). Para tanto, </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">espermatozoides epididimários foram recuperados em diluente TRIS (n=18) ou ACP-117c </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">(n=18) e criopreservados. Estes foram avaliados após coleta, refrigeração (4 °C), glicerolização </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">e pós-descongelação para os parâmetros referentes à: cinética espermática, viabilidade, </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">funcionalidade de membrana plasmática, atividade mitocondrial e morfologia. (Experimento </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">1). No experimento 2, espermatozoides recuperados com diluente TRIS foram refrigerados, </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">glicerolizados por 5 minutos (n = 10) ou 10 minutos (n = 10), em seguidas congelados. Os </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">espermatozoides foram avaliados para motilidade total, vigor espermático, viabilidade, </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">funcionalidade de membrana e morfologia, durante todas as etapas da criopreservação. No </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">experimento 3, espermatozoides normais, previamente corados com Rosa Bengala, foram </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">fotografados em aumento de 1000x e suas estruturas (cabeça, peça intermediária e cauda) </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">mensuradas, usando o programa ImageJ</span><span style="font-size: 8.04pt; font-family: "Times New Roman";">®</span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">. A motilidade total, motilidade progressiva e </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">viabilidade reduziram pós-descongelação para ambos os diluentes testados, sendo TRIS </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">superior ao ACP-117c. Para o ACP-117c também houve redução da velocidade curvilinear e </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">da frequência do batimento flagelar. A atividade mitocondrial reduziu gradativamente durante </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">as etapas da criopreservação para ambos os diluentes, entretanto, o TRIS apresentou maior </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">porcentagem de espermatozoides com atividade elevada e moderada pós-descongelação. Os </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">espermatozoides submetidos à glicerolização por 5 minutos apresentaram motilidade total e </span><span style="font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt;">viabilidade superior em comparação aos submetidos a 10 minutos. Entre estes grupos não houve </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">diferenças quanto ao vigor espermático, funcionalidade da membrana e morfologia. As medidas </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">morfométricas da cabeça espermática foram: 5,56 ± 0,01µm, 3,10 ± 0,01 µm, 16,94 ± 0,05µm</span><span style="font-size: 8.04pt; font-family: "Times New Roman";">2 </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">e 16,16 ± 0,03µm para comprimento, largura, área e perímetro, respectivamente. A peça </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">intermediária apresentou comprimento de 7,96 ± 0,01µm e largura de 0,76 ± 0,01µm; e o </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">comprimento da cauda do espermatozoide foi 45,12 ± 0,06µm. O diluente ACP-117c é uma </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">boa alternativa para a recuperação dos espermatozoides epididimários de gato doméstico, no </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">entanto, não se mostrou eficaz para a criopreservação. A etapa de glicerolização e </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">descongelação mostraram-se as mais críticas para estes espermatozoides. Um menor tempo de </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">equilíbrio da glicerolização proporciona uma melhor preservação da qualidade dos </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">espermatozoides epididimários. A descrição morfométrica do espermatozoide felino indica que </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">este apresenta cabeça alongada; a cauda espermática representa mais de ¾ do comprimento </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">total do gameta; e a peça intermediária ultrapassa o comprimento da cabeça, sendo esta </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">relativamente pequena. </span><span style="font-size: 12pt; font-family: TimesNewRomanPS-BoldMT; font-weight: bold;">Palavras-chave: </span><span style="font-size: 12pt; font-family: "Times New Roman";">Espermatozoide. Gato. Diluente. Criopreservação. Avaliação espermática.</span></div>