Congelação e vetrificação de espermatozóides epididimários de gato doméstico (Felis catus): estabelecimento de protocolos para felinos selvagens ameaçados de extinção.

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: LIMA, Silmara Letícia Gonçalves
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: UFRA/Campus Belém
• Palavras-chave em Português: Gato doméstico - Criopreservação; Epidídimo - Espermatozoides; Felinos - Espermatozoides; Gato doméstico - Espermatozoides
• Link de acesso: http://repositorio.ufra.edu.br/jspui/handle/123456789/981

Objetivou-se investigar o efeito de diferentes osmolaridades do diluidor Tris-citrato acrescido de glicerol ou etilenoglicol na congelação de espermatozóides epididimários e realizar a vitrificação da cauda do epidídimo, para recuperação de espermatozoides viáveis de gatos domésticos (Felis catus). Dessa forma, o trabalho foi dividido em duas fases. Fase 1: Avaliou-se a manutenção dos parâmetros espermáticos em diluidor tris-citrato com osmolaridades 275, 325, 375, 425, 475 e 525mOsm, nos tempos (T0= 0, T1= 30 e T2= 60 min). E a congelação utilizando as osmolaridades 325 e 375 mOsm com glicerol a 4% ou etilenoglicol a 3%, 6% em espermatozoides da cauda do epidídimo de gatos domésticos. Fase 2: Desenvolver um protocolo de vitrificação da cauda do epidídimo de gatos domésticos para a recuperação de espermatozoides viáiveis, utilizando glicerol e etilenoglicol a 40% associados a sacarose a 0,1M, utilizando a de vitrificação de equilíbrio com a técnica de vitrificação em superfície sólida (SSV). Na Fase 1, dentre as osmolaridades, a motilidade da 325 mOsm não diferiu estatísticamente com o fluido epidídimal (controle a fresco) nos três tempos e a 375 mOsm no T0 e T1, e ambas não apresentaram diferenças estatísticas entre si e entre os tempos em todos os parâmetros espermáticos. O uso de 4% de glicerol em diluidor com 375 mOsm foi superior, apresentando motilidade de 25% ± 6, vigor 4, integridade de membrana plasmática de 48% ± 9 após a congelação, não apresentou diferenças estatísticas com a etapa de resfriamento e na morfologia não foram encontradas diferenças estatísticas entre as duas osmolaridades em todas as etapas da congelação. Na Fase 2, o tratamento com etilenoglicol teve melhores resultados para todos os parâmetros de motilidade espermática (Motilidade, Vigor, CASA) comparados para glicerol (P ˂ 0,05). Não houve diferenças estatísticas nos parâmetros de integridade de membrana plasmática e do acrossoma (Azul de tripan e Giemsa), integridade de membrana plasmática utilizando também (corantes fluorescentes Hoechst e Iodeto de propídio) e na morfologia normal dos espermatozoides antes e depois da vitrificação entre os grupos experimentais. Os resultados do presente estudo mostraram que o Tris-citrato com 325 e 375 mOsm entre as osmolaridades testadas e pós congelação com 375 mOsm e glicerol 4% manteve os parâmetros espermáticos, e foi obtido sucesso na vitrificação da cauda do epidídimo com etilenoglicol a 40% associado com sacarose (0,1 M), em espermatozoides epididimários de gatos domésticos.