Prospecção e caracterização de peptídeos nematicidas em sementes de Moringa oleifera para o controle de endoparasitoses em pequenos ruminantes

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Sousa, Ana Marjory Paiba
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual do Ceará
• Palavras-chave em Português: Anti-helmínticos; Pequenos Ruminantes - Nematoides Gastrintestinais
• Link de acesso: https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=96262

<div>Propriedades anti-helmínticas das sementes de Moringa oleifera (moringa) têm sido descritas contra diferentes nematoides gastrintestinais (GI), particularmente sobre Haemonchus contortus. Contudo, estudos acerca da identidade dos compostos ativos, bem como, abordagens visando o uso da moringa para o controle alternativo de helmintoses são bastante limitadas. Assim, o objetivo do presente estudo foi prospectar e caracterizar peptídeos nematicidas em sementes de M. oleifera e avaliar o uso dessas sementes no controle de endoparasitoses em pequenos ruminantes. As etapas de purificação e identificação de compostos ativos foram bioguiadas por testes de eclosão de ovos in vitro, além de ensaios de microfloculação. Extrato aquoso proteico das sementes de moringa foi fracionado através de ultrafiltração em membranas (MWCO 12 e 2 kDa), sendo os peptídeos separados e identificados utilizando técnicas de cromatografia em fase reversa e espectrometria de massa. Para avaliação das sementes em estratégias de controle parasitário, farelo (F-Mo) e torta (T-Mo) de moringa (coprodutos) foram produzidos através de prévia delipidação das sementes com hexano e por prensagem, respectivamente. Em estudo in vivo, os efeitos fitoterápicos do F-Mo e de seu extrato aquoso (EAF-Mo) foram avaliados sobre ovinos da raça Santa Inês (n = 36) infectados artificialmente com nematoides GI e mantidos sob dieta de alto concentrado. Utilizando delineamento inteiramente casualizado, os animais foram distribuídos randomicamente em quatro grupos, cada animal recebeu, por via oral, duas doses de Oxfendazol 2,5 mg/Kg (G1); F-Mo 250 mg/Kg (G2); EAF-Mo 250 mg/Kg (G3) e Água - Grupo não tratado (G4). Coletas de sangue e fezes foram realizadas durante 8 semanas de avaliação, sendo os tratamentos administrados nas semanas 0 e 4. Finalmente, usando experimento em casa de vegetação, avaliou-se os efeitos da aplicação de T-Mo no solo em relação à contaminação de forragem por larvas de nematoides. Os resultados deste estudo demonstraram, de forma inédita, a identificação de quatro peptídeos nematicidas a partir das sementes de moringa, denominados de Mo-HLPs 1-4. Multifuncionais, os Mo-HLPs também se mostraram eficientes em reduzir turbidez de água e foram descritos como novos agentes floculantes da espécie. As análises proteômicas revelaram que Mo-HLPs são moléculas básicas (pI &gt; 10), ricas em cisteínas, com massas entre 4,5 e 4,8 kDa, e com um domínio de ligação à quitina altamente conservado. Buscas no BLAST mostraram que Mo- HLPs pertencem à família de peptídeos hevein-like e apresentam 90% de identidade com morintides de folhas de M. oleifera. In vitro, Mo-HLPs exibiram eficiências distintas entre as isoformas, onde atividades inibitórias da eclosão de ovos variaram de 73% a 100% enquanto os efeitos floculantes registrados foram entre 67% e 89%. In vivo, frente a excelentes condições nutricionais, não foi possível observar diferenças clínicas, parasitológicos ou hematológicas entre grupos tratados e não tratado com moringa (P &gt; 0,05). A porcentagem média de redução da contagem de ovos nas fezes ao final do estudo foi de 88%, 68%, 52% e 74% para G1, G2, G3 e G4, respectivamente. Valores de volume globular e proteínas plasmáticas totais mantiveram-se dentro da normalidade. No experimento em casa de vegetação, a adição de doses crescentes de T-Mo (0, 12.5, 25 e 50 g) sobre o solo de vasos contendo fezes contaminadas mostrou uma tendência de redução nos níveis de infestação de capim-tanzânia por larvas de nematoides. Tal ação nematicida foi acompanhada de aumentos nos índices relativos de clorofila das plantas. Em conclusão, os peptídeos isolados de moringa (Mo-HLPs) representam um novo grupo de agentes nematicidas com potencial para o desenvolvimento de novas drogas anti-helmínticas; o farelo e a torta das sementes apresentam efeitos nematicidas contra estágios de formas de vida livre de nematoides gastrintestinais e podem ser exploradas como opções interessantes para comporem sistemas integrados de controle parasitário, contribuindo para a sustentabilidade dos processos produtivos.</div><div><br/></div><div>Palavras-chave: M. oleifera. Peptídeos. Nematicidas. Ruminantes. Controle integrado.<br/></div><div><br/></div>