Caracterização transcriptômica e proteômica da glândula de feromônio de Lutzomyia longipalpis (Diptera:Psychodidae)

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2013
Autor(a) principal: González Caballero, Norath Natalia
Orientador(a): Brazil, Reginaldo Peçanha, Cuervo Escobar, Patricia
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/26654
Resumo: Lutzomyia longipalpis é o principal vetor de Leishmania infantum, que é o agente etiológico da Leishmaniose Visceral Americana (LVA). Considerado um complexo de espécies crípticas, Lutzomyia longipalpis utiliza diferentes feromônios terpenóides (produzidos por machos) que atuam como atraentes para as fêmeas, e ao mesmo tempo como feromônios de agregação para os machos. A pesar do conhecimento dos principais componentes químicos das misturas de feromônios nada se sabe sobre os genes ou as moléculas diretamente envolvidas na biossíntese ou da sua regulação. Tais moléculas podem representar alvos alternativos de estratégias de controle das populações desses insetos vetores. Neste sentido através de uma abordagem descritiva foi realizado o estudo das sequencias de ESTs assim como também a caracterização subproteômica da glândula de feromônio. Com as análises dos transcritos e através de pesquisas nas bases de dados públicos, um grupo de moléculas potencialmente envolvidas na produção de precursores de terpenóides foi identificado no quarto segmento abdominal (segmento que contém a glândula de feromônio). Tais moléculas incluem transcritos de possíveis enzimas da via do acido mevalônico e sequências associadas à preniltransferases. Motivados por estes resultados também foi realizada uma análise subproteômica da glândula de feromônio combinando cromatografia liquida SDS-PAGE acoplada com espectrometria de massas LC-MS/MS e analises dos dados. Tendo em conta que a anotação funcional das sequências do genoma de Lutzomyia longipalpis ainda é escassa, nós projetamos um fluxo de trabalho alternativo para o mapeamento proteômico da glândula As sequências MS/MS foram pesquisadas contra dois bancos de dados personalizados, utilizando três motores de busca: MASCOT, OMSSA e ProLuCid. Com esta abordagem, foi possível obter as evidências de expressão das enzimas identificadas pela análise de transcritos e ainda aumentar o espaço de busca por similaridade e ampliar as identificações das proteínas da glândula de feromônio de L. longipalpis.