Transplante de células-tronco neurais em modelo experimental de epilepsia do lobo temporal induzido por lítio-pilocarpina em ratos

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: Carvalho, Lian Felipe Paiva Pontes de Carvalho
• Orientador(a): Soares, Milena Botelho Pereira
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Instituto Gonçalo Moniz
• Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/22821

INTRODUÇÃO: Epilepsia do lobo temporal (ELT) é uma desordem cerebral de alta prevalência e de caráter neuroinflamatório crônico e progressivo, geralmente levando à refratariedade medicamentosa. O transplante de células-tronco neurais (NSC, do inglês neural stem cell) é uma boa alternativa para o tratamento dessa doença, devido à capacidade dessas células de proliferação e diferenciação nos tipos celulares presentes no sistema nervoso central (SNC), além de possuírem efeitos imunomodulatórios e neurotróficos. OBJETIVO: Nosso estudo teve como objetivo caracterizar células-tronco neurais adultas e avaliar seu potencial terapêutico quando administradas na fase aguda do modelo de ELT induzida por lítio-pilocarpina em ratos Wistar. MATERIAL E MÉTODOS: Nosso estudo, inicialmente, se concentrou na caracterização, por imunofluorescência e citometria de fluxo, de NSC isoladas da zona subventricular de camundongos C57/BL6 adultos, a avaliação da segurança dessas células, através de análise cromossômica e de ensaio de formação de tumor, e a análise do potencial imunomodulatório das células in vitro, por ensaios de linfoproliferação. Em seguida, avaliou-se o efeito do transplante das NSC, via intravenosa, na fase aguda de modelo de ELT em ratos induzidos por lítio-pilocarpina. Os animais foram eutanasiados 24 horas e 12 dias depois do transplante para análises da migração celular, proteção da perda neuronal e quantificação dos níveis das citocinas IL-1β, IL-6 e IL-10 no soro por ELISA e in situ por imunofluorescência. CONCLUSÕES: As análises de caracterização confirmaram que a linhagem celular estudada possui fenótipos característicos de NSC (positividade para nestina e side population), possui a capacidade em se diferenciar em células da linhagem neuronal e glial, possui potencial imunossupressor na proliferação de esplenócitos in vitro e não forma tumores em camundongos SCID, mostrando que a linhagem é segura para o uso em terapia celular. O resultado do transplante mostrou que apesar de ter sido observado presença das NSC transplantadas no baço, elas não foram encontradas nos cérebros, colocando em duvida o seu potencial migratório para o local da lesão. As NSC não foram capazes de proteger os animais contra a perda neuronal nos dois pontos de eutanásia avaliados, mas diminuiu de forma significativa a quantidade de IL-1β no cérebro 24 horas depois, sem afetar os níveis de IL-6. O presente estudo mostrou que apesar dos resultados promissores in vitro, novas abordagens relacionadas ás condições de transplante dever ser consideradas para se obter melhor eficácia ao usar essas células in vivo.