Diversidade de tripanosomatídeos em pequenos mamíferos provenientes da Estação Biológica FIOCRUZ da Mata Atlântica, Rio de Janeiro

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Berbigier, Alice Pereira
• Orientador(a): Roque, André Luiz Rodrigues
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/43828

Tripanosomatídeos compreendem uma diversidade de protozoários parasitas que podem ser encontrados em diversas espécies de hospedeiros, incluindo os pequenos mamíferos (roedores, marsupiais e morcegos) que possuem papéis importantes nos ciclos de manutenção e transmissão desses parasitas. O diagnóstico molecular da infecção diretamente em tecidos dos seus hospedeiros podem resultar na detecção de espécies de tripanosomatídeos não detectadas em outras técnicas, como culturas, exame a fresco, ou sorologia. O objetivo deste estudo foi diagnosticar molecularmente a infecção e identificar a diversidade de tripanosomatídeos presentes em tecidos de pele, baço e fígado de pequenos mamíferos silvestres provenientes da Estação Biológica Fiocruz Mata Atlântica (EFMA), Rio de Janeiro/RJ, considerada uma área de proteção ambiental com diferentes níveis de degradação. Amostras biológicas de pequenos mamíferos capturados na EFMA foram submetidas anteriormente a outros exames diagnósticos: exames a fresco de sangue, culturas de sangue e tecidos, PCR em tecidos direcionado a infecção por Leishmania sp. e sorologia (RIFI), esta última apenas em amostras de roedores e marsupiais. As amostras de tecidos desses pequenos mamíferos foram submetidas à extração de DNA, seguida de uma reação em cadeia da polimerase (PCRnested) utilizando o marcador 18S rDNA Os produtos amplificados foram sequenciados e analisados por meio de inferência filogenética por máxima verossimilhança. O teste estatístico Qui-quadrado foi aplicado para avaliar a relação entre áreas de coletas com a taxa de infecção dos tripanosomatídeos detectados. Das 422 amostras de tecidos analisadas, 33 (7,8% = 26 indivíduos) foram positivas no diagnóstico molecular. Destas, 22 foram posicionadas filogeneticamente dentro do clado Trypanosoma cruzi: T. cruzi TcI (n=9), Trypanosoma dionisii (n=7), Trypanosoma rangeli A (n=1), Trypanosoma sp. Neobat 1 (n=3) e Trypanosoma sp. Neobat 4 (n=2). As 11 amostras não caracterizadas no nível de espécie foram classificadas como Trypanosomatidae. Dos 26 indivíduos positivos, 15 também haviam sido positivos nos outros testes diagnósticos, no qual o diagnóstico molecular diretamente em tecidos complementou e confirmou os resultados destas outras técnicas. Estes 26 hospedeiros positivos estavam distribuídos por todas as três áreas de captura da EFMA (peridomicílio (n=10), transição (n=10) e mata (n=6)). A análise estatística mostrou que não houve relação entre os diferentes níveis de degradação das áreas de captura com a distribuição dos tripanosomatídeos. A diversidade de tripanosomatídeos encontrada (5 diferentes espécies/genótipos) pode ser considerada elevada, visto que as áreas de coletas são relativamente pequenas, a diversidade faunística não é grande e o nível de influência antrópica é elevado. O diagnóstico molecular diretamente em tecidos se mostrou eficiente, pois além de diagnosticar a infecção por tripanosomatídeos em hospedeiros considerados previamente negativos, também diagnosticou parasitas que até o momento só podem ser detectados por meio do diagnóstico molecular, como os genótipos de Trypanosoma sp. Neobat 1 e 4.