Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2020 |
| Autor(a) principal: |
Paiva, Luciene Pimenta de Paiva |
| Orientador(a): |
Martins Filho, Olindo Assis,
Reis, Jordana Grazziela Alves Coelho dos |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Dissertação
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Não Informado pela instituição
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Link de acesso: |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/48362
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Resumo: |
O HTLV (Human T-lymphotropic virus) é o primeiro retrovírus descoberto associado a doenças em humanos. Existem mais de 10 milhões de pessoas infectadas em todo o mundo, sendo o Brasil, globalmente, o país com o maior número absoluto de casos da infecção. Aproximadamente 95 a 98% dos indivíduos infectados pelo HTLV permanecem assintomáticos, no entanto, 2 a 5% dos infectados podem desenvolver manifestações clínicas graves. Enquanto a infecção pelo HTLV-1 pode se manifestar com doenças de alta gravidade, como a Mielopatia Associada ao HTLV ou Paraparesia Espástica Tropical (HAM/TSP), o HTLV-2 é associado predominantemente com quadros benignos e doença assintomática. Apesar da importância clínica de se distinguir a infecção pelo HTLV-1 e HTLV-2, existe uma atual escassez de métodos de tipagem capazes de distinguir anticorpos gerados para estes dois tipos virais. Desta forma, este trabalho teve como foco o desenvolvimento de um novo método sorológico, denominado FC-Duplex IgG1 (HTLV-1/2), baseado em um protocolo de marcação fluorescente diferencial, utilizando Alexa Flúor-647, de linhagens celulares infectadas pelo HTLV-1 (MT-2) e HTLV-2 (MoT) para análise seletiva simultânea empregando plataforma única por citometria de fluxo. Por meio do FC-Duplex IgG1 (HTLV-1/2) foi possível avaliar a reatividade de anticorpos IgG1 anti-HTLV-1/2 em amostras de soro de indivíduos infectados pelo HTLV-1/2 e doadores saudáveis com alta sensibilidade e especificidade no diagnóstico universal e diferencial da infecção. A metodologia desenvolvida apresentou alta estabilidade da marcação fluorescente diferencial e da antigenicidade das linhagens celulares MT-2 e MoT em diferentes condições (TA, 4ºC e -20ºC) e tempos (2, 6 e 12 meses) de armazenamento. Utilizando um algoritmo de decisão assincrônico, foi possível realizar o diagnóstico diferencial da infecção pelo HTLV-1/2 empregando a metodologia FC-Duplex IgG1 (HTLV-1/2). Por fim, a avaliação do desempenho de FC-Duplex IgG1 (HTLV-1/2) indicou potencial para o prognóstico da infecção pelo HTLV-1. A metodologia permitiu o depósito de patente, o que define o potencial inovador de FC-Duplex IgG1 (HTLV-1/2) no diagnóstico universal e diferencial da infecção pelo HTLV-1/2. De nosso conhecimento, esta é a primeira estratégia sorológica, além do Western Blot, capaz de segregar indivíduos infectados pelo HTLV-1 e HTLV-2, empregando plataforma única para pesquisa de anticorpos IgG1 por citometria de fluxo. |
