Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2011 |
| Autor(a) principal: |
Pitanga, Thassila Nogueira |
| Orientador(a): |
dosSantos, Washington Luis Conrado |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Dissertação
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Não Informado pela instituição
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Link de acesso: |
https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/4314
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Resumo: |
Micropartículas (MPs) são vesículas liberadas da membrana plasmática após ativação celular ou fases iniciais de apoptose. MPs de neutrófilos (NMPs) apresentam em suas membranas diferentes proteínas com diferentes funções e diretamente relacionadas com seus efeitos biológicos, tais como mediadores inflamatórios (integrinas e L-selectina) e mieloperoxidase (MPO). A MPO é uma enzima catiônica, presente nos grânulos azurófilos de neutrófilos e monócitos, responsável pela formação de espécies reativas de oxigênio (ROS). Na presença de peróxido de hidrogênio (H2O2), a enzima catalisa a oxidação de íons cloro com a formação de ácido hipocloroso (HOCl). MPs de diversas origens parecem afetar a função vascular por mecanismos dependentes do estresse oxidativo. No presente trabalho investigamos o possível papel de NMPs na lesão de células endoteliais vasculares in vitro. NMPs foram produzidas por ativação de polimorfonucleares (PMNs) humanos com ionóforo de cálcio e caracterizadas por microscopia eletrônica de transmissão e varredura como estruturas delimitadas por bicamada lipídica e com diâmetro menor do que 1 m. A presença da MPO foi confirmada por citometria de fluxo, utilizando o anticorpo anti-MPO, e pela atividade enzimática detectada por quimioluminescência de HOCl, uma ROS catalisada unicamente pela MPO. A adição de azida, inibidor de peroxidases, ou de taurina, “scavanger” de HOCl, inibiu ou reduziu a atividade enzimática, respectivamente. Identificamos moléculas expressas na superfície das NMPs (CD62L, CD66b, CD45, CD95 e fosfatidilserina). A atividade de MPO foi observada após incubação das células endoteliais vasculares in vitro com NMPs, sugerindo que estas apresentam um potencial de carrear a MPO para a superfície endotelial vascular. A exposição de células endoteliais a NMPs induziu alterações morfológicas e perda da integridade da membrana celular, analisadas, respectivamente, por microscópio de contraste de fase e microscopia de fluorescência. Nossos resultados sugerem que NMPs atuam como carreadoras de MPO para a superfície de células endoteliais vasculares e induzem lesão destas células em um mecanismo dependente de MPO, sugerindo sua participação no desenvolvimento das complicações cardiovasculares. |
