PCR multiplex em tempo real para detecção de fontes alimentares e de Leishmania spp. em flebotomíneos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2019
Autor(a) principal: Sales, Kamila Gaudêncio da Silva
Orientador(a): Torres, Filipe Dantas
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Link de acesso: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/60243
Resumo: No presente trabalho, objetivou-se desenvolver um ensaio de PCR em tempo real multiplex para detectar simutaneamente DNA de cão, humano e Leishmania spp. em flebotomíneos. Primers e sondas TaqMan visando os genes mitocondriais: citocromo c oxidase subunidade I e citocromo b de cão e humano, respectivamente, foram combinados em um ensaio multiplex, no qual também foram incluídos primers e uma sonda TaqMan visando o DNA do cinetoplasto de Leishmania. O ensaio multiplex foi 100% específico, com sensibilidade analítica de 103 fg por reação para cão e humano e 1 fg para Leishmania. Ao testar fêmeas de flebotomíneos ingurgitadas coletadas em campo (95 Migonemyia migonei e dois Nyssomyia intermedia), 50 M. migonei foram positivas para um ou dois alvos (taxas de positividade: 45,4% para humanos, 4,1% para cães e 12,4% para Leishmania spp.). Este ensaio multiplex de PCR em tempo real representa um novo e rápido teste para detectar DNA de cão, humano e Leishmania spp. em fêmeas de flebotomíneos e, portanto, uma ferramenta para avaliar o risco de transmissão de Leishmania em áreas onde as leishmanioses são endêmicas.