Avaliação da concentração inibitória mínima da lisozima em bactéria gram-positiva, gram-negativa e fungo : estudo in vitro

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Main Author: Lemgruber, Rodrigo Carvalho
Publication Date: 2023
Format: Master thesis
Language: por
Source: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Faculdade São Leopoldo Mandic
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Summary: Dissertação (Mestrado em Clínica Odontológica Integrada) - Centro de Pesquisas Odontológicas São Leopoldo Mandic.
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spelling Avaliação da concentração inibitória mínima da lisozima em bactéria gram-positiva, gram-negativa e fungo : estudo in vitroBiofilmeLisozimaEscherichia coliStaphylococcus aureusCandida albicansDissertação (Mestrado em Clínica Odontológica Integrada) - Centro de Pesquisas Odontológicas São Leopoldo Mandic.O objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a concentracao inibitoria minima (CIM) da lisozima sobre a bacteria Gram-negativa Escherichia coli (E. coli), bacteria Gram-positiva Staphylococcus aureus (S. aureus) e o fungo Candida albicans (C. albicans). Para isto, cepas de E. coli (ATCC 25922), S. aureus (ATCC 25923) e C. albicans (ATCC10231) foram reativados a partir de culturas de estoque em meio infusao de cerebro e coracao (BHI) caldo por 24 h a 37 ‹C e 10% CO2 em estufa microbiologica. Posteriormente, 100 ƒÊL de cada solucao de estoque foram adicionados em placa petri contendo meio BHI agar para S. aureus e E. coli e meio Sabouraud para C. albicans e estas placas foram incubadas novamente sob as mesmas condicoes. Apos o crescimento microbiano, colonias individuais foram suspensas em 5 mL de solucao salina. A densidade optica destas suspensoes foram corrigidas em espectrofotometro utilizando um comprimento de onda de 625 nm ate atingir a turbidez padronizada de 0,5 da escala de McFarland. Em seguida, 50 ƒÊL de cada suspensao microbiana foi diluida em 10 mL de solucao salina para atingir a densidade microbiana de 5x105 UFC/mL. A lisozima da clara de ovo de galinha em po (62971 10G-F) foi diluida em agua destilada esteril com concentracao inicial de 1000 ƒÊg/mL. Posteriormente, diluicoes seriadas foram realizadas para obtencao da lisozima nas concentracoes de 100 a 500 ƒÊg/mL. A CIM foi determinada pela tecnica de microdiluicao em caldo e os experimentos foram realizados em triplicata. Inicialmente, 100 ƒÊL de meio de cultura BHI esteril foi distribuido nos pocos. Em seguida, parte do meio foi removido e uma aliquota de solucao de lisozima mae foi adicionada, de forma a se obter pocos com volumes padronizados de 100 ƒÊL nas concentracoes de interesse (500, 400, 300, 200 e 100 ƒÊg/mL). Em seguida 10 ƒÊL de cada uma das suspensoes bacterianas foram inoculadas nos pocos e as placas foram seladas e incubadas a 35 ‹C por 20 h em estufa microbiologica 10% CO2. A analise da absorbancia foi realizada em espectrofotometro para determinacao da CIM. O efeito bacteriostatico da lisozima tambem foi confirmado pela analise visual do crescimento bacteriano. Para isto, as suspensoes bacterianas foram semeados em placas de petri contendo meios especificos para cada microrganismo e incubadas por 48 h a 37 oC em estufa microbiologica 10% CO2. Analises descritivas e exploratorias do teste de absorbancia e do crescimento bacteriano foram realizadas para determinacao da CIM. Em seguida, testes nao-parametricos de Kruskall-Wallis e Dunn foram empregados para comparacoes multiplas e determinacao do tamanho do efeito (.2). Apos analises dos dados pode-se observar que a CIM foi 300 ƒÊg/mL para E. coli (p-valor= 0,0084; ƒÃ2 = 0,9771), S. aureus (p-valor= 0,0464; ƒÃ2 = 0,6905) e C. albicans (p-valor= 0,1207; ƒÃ2 = 0,5216). Conclui-se que a lisozima apresentou uma acao bacteriostatica efetiva sobre os microrganismos E. coli, S. aureus e C. albicans, sendo a concentracao inibitoria minima de 300 ƒÊg/mL para todas as cepas analisadas.[s.n.]Peruzzo, Daiane CristinaCentro de Pesquisas Odontológicas São Leopoldo MandicLemgruber, Rodrigo Carvalho2023info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf42f. : il.https://biblioteca.slmandic.edu.br/TerminalWebRI/acervo/detalhe/186238https://biblioteca.slmandic.edu.br/TerminalWebRI/acervo/detalhe/186238porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Faculdade São Leopoldo Mandicinstname:Faculdade São Leopoldo Mandicinstacron:SLMANDICinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-09-30T09:24:43Zoai:prima.com.br:186238Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPRIhttps://biblioteca.slmandic.edu.br/biblioteca/oai/oai.aspsamanta.capeletto@slmandic.edu.bropendoar:2024-09-30T09:24:43Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Faculdade São Leopoldo Mandic - Faculdade São Leopoldo Mandicfalse
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