SEPARAÇÃO DE PROTEÍNAS DA CLARA DO OVO DE GALINHA POR MEMBRANAS FILTRANTES E ANÁLISE DO SEU POTENCIAL ANTIMICROBIANO

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2023
Autor(a) principal: Oberherr, Renata lattes
Orientador(a): Stülp , Simone lattes
Banca de defesa: Konrad, Odorico, Heidrich, Daiane, Lara, Daniela Mueller de
Tipo de documento: Tese
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Não Informado pela instituição
Programa de Pós-Graduação: PPGAD;Ambiente e Desenvolvimento
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
CB
Link de acesso: http://hdl.handle.net/10737/3934
Resumo: As mudanças nas formas de produção têm ganhado destaque devido à crescente integração de produtos naturais nos processos industriais. Essas mudanças têm sido impulsionadas, principalmente, pela mudança de atitude dos consumidores em relação ao meio ambiente, à sustentabilidade e à segurança alimentar. Nesse contexto, os agentes antimicrobianos são uma alternativa e agem preservando os alimentos, limitando o crescimento dos microrganismos patogênicos. Dentre eles, as proteínas ou concentrados protéicos, provenientes da clara do ovo de galinha ocupam lugar de destaque, pois além de ser excelente fonte de proteínas a clara do ovo também contém um arsenal de moléculas antimicrobianas. Assim, este estudo teve como objetivo central a concentração de proteínas com potencial antimicrobiano presentes na clara do ovo de galinha, com posterior avaliação da eficácia antimicrobiana dessas proteínas frente a microrganismos patogênicos comuns na indústria alimentícia. Para atingir esse objetivo, realizou-se a concentração das proteínas da clara de ovo, tanto da forma pasteurizada quanto in natura. Utilizamos uma série de etapas de ultrafiltração, empregando membranas orgânicas de polietersulfona com diferentes tamanhos de poros (200 kDa, 50 kDa e 20 kDa) em uma planta piloto de bancada. Inicialmente foram testadas condições para determinação dos parâmetros ótimos de operação do sistema (pressão, velocidade de agitação e solução de alimentação). Os ensaios ocorreram em temperatura ambiente e as alíquotas das proteínas de interesse (avidina, ovotransferrina e lisozima) foram coletadas nos ciclos intermediário e final dos processos de ultrafiltração (UF). Com os parâmetros de operação definidos pressão de 5 bar, 15 rpm de velocidade de agitação, e solução de clara de ovo in natura, as amostras foram dessalinizadas utilizando tecnologia de diálise com membrana semipermeável e secas por meio da técnica de liofilização. Análise cromatográfica em condição de fase reversa foi realizada para identificação e quantificação dos concentrados proteicos. A atividade antimicrobiana foi realizada utilizando a metodologia de microdiluição em placa de 96 poços, adaptada de Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, 2012) frente a microrganismos patógenos de interesse da indústria de alimentos como Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus cereus isolado ambiental, Escherichia coli, Salmonella enteritidis. A etapa de dessalinização ocorreu ao longo das etapas de UF. Pode-se observar que a concentração de íons sódio foram reduzidas nas correntes de interesse retentado (50 kDa) e permeado (20 kDA) na ordem de 96,25% e 98,01%, respectivamente. Com a dessalinização essa concentração foi reduzida para 8 mg/L. Os picos cromatográficos foram identificados em tempos de retenção de 11,99 min e 11,09 min para etapas intermediária e final, respectivamente. Através da medição das áreas dos picos formados, foi possível calcular a concentração das proteínas de interesse. No último estágio de filtração, a lisozima foi concentrada a 9,83 mg/L, enquanto nas etapas intermediárias, as concentrações de lisozima (LZ) e ovotransferrina (OVT) atingiram 35,99 mg LZ/L e 95,50 mg OVT/L, respectivamente. As amostras então foram testadas em microrganismos da indústria láctea e cárnea e pode-se observar que não houveram diferenças significativas entre as amostras avaliadas. Entretanto, quando comparada a amostra da retentada e o padrão comercial LZ, observou-se diferença significativa, especialmente para B. cereus e E.coli. Logo o resultado acima obtido foi adequado para o objetivo proposto.