Isolamento e caracterização molecular do Bacillus thuringiensis (Bt) (Bacillaceae), em solos sob cultivo orgânico
| Ano de defesa: | 2017 |
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| Autor(a) principal: |
Mascarello, Leide Daiane do Nascimento
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| Orientador(a): |
Maniglia, Thiago Cintra
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| Banca de defesa: | , , |
| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Tecnológica Federal do Paraná
Dois Vizinhos |
| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Agroecossistemas
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Brasil
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| Palavras-chave em Português: | |
| Área do conhecimento CNPq: | |
| Link de acesso: | http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/4340 |
Resumo: | O Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria Gram positiva, esporulante, que se caracteriza por apresentar cristais proteicos em sua estrutura. Possui alta toxidade a várias ordens de insetos, o que desperta o interesse em pesquisas nesse setor em busca do controle de espéciespraga que acometem a produção agrícola e florestal. Os produtos sob regime de cultivo orgânico também já se beneficiam dos resultados no controle biológico de pragas utilizandose de estipes comerciais. Nesse contexto, os estudos nesse setor assumem o papel estratégico de promoção do desenvolvimento sustentável no uso do solo, podendo proporcionar qualidade e segurança alimentar. Com o objetivo de reunir dados de publicações nas áreas de ciências agrárias sobre toxidade, isolamento, ecologia e caracterização molecular dessa bactéria, foi realizado uma análise cienciométrica de produções científicas com data até abril de 2017, agrupando-os de acordo com o idioma, país de publicação, ano e área de concentração das pesquisas. Foram encontrados um total de 14.098 artigos. No decorrer do estudo pode-se perceber que o país que mais publicou artigos sobre Bacillus thuringiensis foi os EUA, que também é um grande produtor agrícola mundial, o que justifica tantas pesquisas nesta área. O Brasil ficou em nono lugar no ranking, entre o México e Alemanha, mas sendo o primeiro dentro da América do Sul em publicações. Além disso, observou-se um aumento constante de publicações envolvendo este método alternativo de controle de pragas, principalmente a partir de 1960. Essa década se destaca pela expansão de fronteiras agrícolas, utilização de técnicas e manejos de produção agrícola intensiva e uso indiscriminado de agrotóxicos. Como consequência, houve aparecimento de espécies-praga resistentes às formulações químicas. Este resultado evidencia de forma clara a crescente conscientização da comunidade científica quanto à necessidade de sustentabilidade e redução de agroquímicos lançados ao ambiente. Com relação à pesquisa aplicada durante os meses de abril e maio de 2016, foram realizadas coletas de solo em sistemas de plantio orgânico certificados, e isolamentos do Bt. Posteriormente, foi realizada a identificação da presença dos genes cry1, cry2, cry3 e cry11 nos isolados. As amostras foram obtidas em áreas sob cultivo agrícola, Área de Preservação Permanente (APP) e Reserva Legal (RL) de cada propriedade. Para as análises morfológicas foram preparadas lâminas e observadas em microscopia de contraste de fase (1000 ×), para a verificação da presença de corpos de inclusões parasporais (cristais). Observou-se resultado positivo em 17 amostras. A extração de DNA foi realizada pelo método de fervura, seguido de eletroforese em gel de agarose para quantificação do DNA variando de 10ng a 40ng. Para a amplificação dos genes cry foram realizados testes preliminares através de reação em cadeia da polimerase (PCR) seguidos de eletroforese em gel de agarose. Obteve-se padrão satisfatório com temperatura de anelamento em 50ºC para o gene cry11. A maior frequência desses isolados que apresentavam o gene de interesse foram identificadas em amostras coletadas em áreas de Reserva Legal. |