Efeito da crotoxina na função de macrófagos de camundongos sépticos

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Bretones, Marisa Langeani
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Camundongos endogâmicos BALB C; Citocinas; Crotoxin; Crotoxina; Cytokines; Immune system; Inflamação; Inflammation; Lipoxinas; Lipoxins; Mice inbred BALB C; Sepse; Sepsis; Sistema imunitário
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5165/tde-22092021-103414/

A sepse é uma síndrome de alterações fisiológicas e bioquímicas induzidas por infecção que representa um grande problema de saúde pública mundial. Ela envolve a ativação precoce de respostas pró e anti-inflamatórias. A crotoxina (CTX), a principal toxina do veneno da cascavel sul-americana (Crotalus durissus terrificus), apresenta propriedades anti-inflamatórias conhecidas, como inibição da fagocitose por neutrófilos e macrófagos e da produção de citocinas por células dendríticas. Nosso objetivo foi avaliar se a administração de CTX seria capaz de reduzir a mortalidade por sepse através da modulação de parâmetros inflamatórios. Utilizamos camundongos Balb/c machos, nos quais induzimos a sepse por punção e ligadura cecal (CLP) utilizando punção dupla com agulha de calibre 18G. Os animais foram tratados com CTX (0,9 g / animal, por via subcutânea) 1 hora após a CLP e sacrificados após 6 h. Utilizamos amostras de plasma para quantificar citocinas e eicosanóides circulantes. Os macrófagos diferenciados da medula óssea foram utilizados para avaliar o efeito da CTX em diferentes funções dos macrófagos, como: capacidade fagocítica, conteúdo intracelular de superóxido e óxido nítrico (NO), e as produções de peróxido de hidrogênio (H2O2) e citocinas. Nossos resultados mostram que a administração de CTX aumentou a taxa de sobrevivência dos animais de 45% para 70%. Não foi detectado efeito da CTX sobre a concentração de citocinas plasmáticas em animais saudáveis. Camundongos sépticos apresentaram menor concentração plasmática de IL-6 e TNF-alfa após o tratamento com CTX e maior concentração de LXA4 e IL-1beta. Nenhum efeito foi observado na concentração de IL-10 e IFN-gama. Macrófagos diferenciados da medula óssea de camundongos sépticos tratados com CTX fagocitaram menos E. coli, mas mantiveram a produção de NO e H2O2. Também observamos maior concentração de IL-6 no meio de cultura de células provenientes de camundongos sépticos, e a CTX induziu uma redução significativa. Nossos dados mostram que o efeito protetor da CTX na mortalidade por sepse envolve modulação das funções dos macrófagos e da produção de mediadores inflamatórios.