Consequências da deficiência do gene Aire na estrutura do timo e na autoimunidade agressiva num modelo experimental no camundongo Mus musculus

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Munuera, Matheus Dominato
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Aggressive autoimmunity; Aire gene; Apeced; Autoimunidade agressiva; Crispr-cas-9 system; Gene Aire; Sistema crispr-cas-9; Th17; Thymocytes; Thymus; Timo; Timócitos
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-26092024-160452/

O gene autoimmune regulator (Aire) codifica a proteína homônima cuja principal função é a regulação da expressão gênica promíscua (PGE) de autoantígenos de tecidos periféricos (PTAs) em células tímicas epiteliais medulares (mTECs). Este processo é fundamental para que timócitos que reconhecem avidamente os PTAs sejam eliminados ainda no interior do timo (na medula tímica) por meio de seleção negativa. Esta é a base da indução da tolerância imunológica com implicações na prevenção das doenças autoimunes. Mutações em Aire provocam a síndrome autoimune APS-1, cujos pacientes apresentam infiltrados de linfócitos T autoreativos em órgãos periféricos assim como a produção de anticorpos neutralizantes contra determinadas citocinas. Nosso objetivo é a avaliação de um modelo experimental no camundongo Mus musculus que consiste num animal mutante no gene Aire gerado através da indução de mutações, com o sistema CRISPR/Cas-9, no exon 6 do gene Aire que codifica o domínio SAND da proteína analisando parâmetros como histologia do timo e de órgãos periféricos desses animais para avaliarmos a ocorrência, ou não, de infiltrados linfocitários assim como a dosagem de citocinas inflamatórias séricas. Nós conseguimos demonstrar que a deficiência heterozigótica do gene Aire (Aire wt/mut) desestrutura a medula do timo, desequilibra a expressão de citocinas inflamatórias e está associada com o aparecimento de alopecia areata nos animais mutantes. Os resultados demonstram que o modelo experimental de deficiência de Aire no camundongo gerado pelo sistema CRISPR/Cas-9 é adequado para estudos sobre a quebra da tolerância imunológica.