Caracterização e avaliação da atividade biológica de peptídeos antimicrobianos de ouriços-do-mar Lytechinus variegatus

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Figueiredo, Débora Alvares Leite
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Antimicrobial proteins; Diferenças entre gêneros; Gender diferences; Innate immune syste; Marine natural products; Produtos naturais marinhos; Proteínas antimicrobianas; Reprodução; Reproduction; Sistema imune inato
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-23112022-144224/

Os ouriços-do-mar são animais pertencentes ao filo Echinodermata, são animais marinhos bentônicos que vivem em um ambiente agressivo expostos a uma grande diversidade de microrganismos e necessitam de uma resposta imune eficiente para lidar com potenciais patógenos, tanto no adulto, como nos processos reprodutivos e no desenvolvimento das larvas, que vivem livres na coluna dagua. As gônadas dos ouriços-do-mar, além da função reprodutiva, são também locais de armazenamento de nutrientes e os gametas contém nutrientes que podem ser explorados por outros organismos, assim é de se esperar que tanto as gônadas como os gametas apresentem mecanismos e moléculas para proteção e defesa. O estudo das moléculas relacionadas ao sistema imune nas gônadas é importante tanto para compreender os mecanismos de defesa nos processos reprodutivos como também na descoberta de novas moléculas antimicrobianas que tenham potencial biotecnológico para o desenvolvimento de novos fármacos uma vez que a resistência aos antibióticos têm crescido nos últimos anos e se tornado um grave problema de saúde. O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar moléculas bioativas a partir do líquido celomático e das gônadas do ouriço-do-mar Lytechinus variegatus. Para isso as amostras obtidas por extração ácida foram fracionadas por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e testadas quanto a atividade antimicrobiana e hemolítica sendo as frações obtidas das gônadas de machos e fêmeas submetidas a análises por espectrometria de massas para caracterização e identificação dos compostos isolados. Os resultados mostraram que tanto as gônadas como líquido celomático apresentam uma grande quantidade de moléculas com atividade antimicrobiana atuando nesses tecidos indicando um importante papel na resposta à invasores. Nas gônadas essas moléculas foram encontradas nos machos e nas fêmeas, sendo as proteínas encontradas fragmentos de uma glicoproteína denominada Major Yolk Protein (MYP), também conhecida como toposomo, presente em grande quantidade nas gônadas dos animais. As análises indicam que nas gônadas ocorre a proteólise da MYP gerando diferentes fragmentos proteicos com atividade antimicrobiana. Isso indica uma forma rápida de resposta contra potenciais microrganismos invasores nas gônadas ou como proteção inicial para os gametas que são liberados na água. Juntos nossos resultados evidenciam a grande quantidade de moléculas com ação antimicrobiana presentes em ambos os sexos e em diferentes tecidos nos animais. Nas gônadas a formação dessas moléculas ocorre pela proteólise da MYP indicando uma função imune dessa proteína em Lytechinus variegatus. Além de proporcionar um melhor entendimento sobre a resposta imune nesses animais, o estudo e a caracterização dessas moléculas pode também contribuir para o desenvolvimento de novos produtos biotecnológicos, especialmente em relação ao desenvolvimento de novos fármacos com ação antimicrobiana, auxiliando no tratamento contra bactérias multirresistentes.