Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2023 |
| Autor(a) principal: |
Cambui, Caio Cesar Nogueira |
| Orientador(a): |
Não Informado pela instituição |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
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| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: |
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| Link de acesso: |
https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-22112023-122559/
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Resumo: |
Anticorpos são proteínas usadas pelo sistema imunológico para identificar e neutralizar corpos estranhos como bactérias, vírus ou células tumorais. O uso de anticorpos, especialmente anticorpos monoclonais, encontra aplicações que se estendem desde o seu uso como ferramentas científicas, até biofármacos para o tratamento das mais diversas doenças. A produção de anticorpos monoclonais, todavia, é um processo árduo. As principais técnicas para a produção dessas biomoléculas, como o hibridoma ou phage display de anticorpos são dependentes da imunização de animais, um fator limitante, especialmente se o antígeno a ser utilizado for pouco imunogênico, um antígeno próprio ou altamente tóxico. Nesse trabalho, estabelecemos um método alternativo para a produção racional de anticorpos utilizando uma combinação de phage display de peptídeos e phage display de anticorpos. A primeira técnica permite o isolamento de ligantes bioativos. Esses ligantes podem então ser inseridos em estruturas de anticorpos nas regiões de reconhecimento do antígeno para a produção de bibliotecas de anticorpos direcionados contra o alvo em estudo, permitindo, deste modo, a seleção de imunoglobulinas específicas e direcionadas a regiões biologicamente importantes do alvo. Demonstramos a viabilidade desse processo isolando anticorpos anti-Tie1. Tie1 é um receptor tirosina quinase expresso em células endoteliais que é importante no processo de formação de vasos sanguíneos a partir de vasos pré-existentes (angiogênese). Esse receptor pertence a uma família composta por apenas um outro membro, o receptor Tie2. Apesar do extenso conhecimento a respeito dos ligantes e vias de sinalização ativadas por Tie2, Tie1 continua a ser, até o momento, um receptor órfão. Utilizando a tecnologia de phage display de peptídeos, isolamos um ligante de Tie1 capaz de inibir a angiogênese em um modelo murino de retinopatia induzida por oxigênio. Esse peptídeo foi então utilizado como base para a construção debibliotecas de anticorpos direcionados contra a porção extracelular de Tie1. Mostramos que nosso método é eficiente para o isolamento de anticorpos monoclonais no formato de single chain (scFv). Além disso, utilizando a tecnologia de phage display de peptídeos, isolamos um peptídeo contra o receptor gp130, um receptor transmembrânico que atua na inflamação, na angiogenese e em diversos outros processos biológicos. Esse peptídeo poderá ser explorado, futuramente, em vias relacionadas à resposta imune, inflamação, assim como na angiogênese. |
