A sinalização através do receptor Axl desempenha um papel protetor para o hospedeiro durante a tuberculose experimental

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Correa, André Aparecido dos Santos
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Axl; Gas-6 e inflamação; Gas6 and inflammation; MerTK; Mycobacterium tuberculosis; Receptores TAM; TAM receptors
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17147/tde-10042023-162038/

A tuberculose (TB), causada pelo bacilo Mycobacterium tuberculosis (Mtb) é a doença infecciosa que mais matou pessoas na última década. Estratégias voltadas para a modulação das respostas imunes do hospedeiro têm sido propostas como terapias adjuvantes promissoras aos antibióticos, com o objetivo de otimizar o tratamento da TB. Os receptores Axl e MerTK reconhecem a fosfatidilserina ligada a Gas6 na superfície das células apoptóticas e desencadeiam sinalização intracelular anti-inflamatória e imunossupressora. O papel desses receptores na patogenia da TB é desconhecido, entretanto, considerando-se seu potencial imunorregulador, é possível que a caracterização de seu papel durante a infecção por Mtb identifique tal via como potencial alvo para intervenções imuno-farmacológicas com o objetivo de otimizar a terapia para a TB. O objetivo deste projeto, portanto foi caracterizar o papel desempenhado pelos receptores Axl e MerTK durante a TB experimental. Inicialmente observamos que a infecção de macrófagos com Mtb H37Rv induz aumento relevante da expressão de Axl, mas não de MerTK nessas células. Tal aumento ocorreu de maneira parcialmente dependente da expressão de ESAT6 pela bactéria e da ativação do receptor Toll Like Receptor 2 (TLR2) nos macrófagos infectados. In vivo, observamos que a infecção com Mtb induz aumento da expressão de Axl e MerTK principalmente em macrófagos inflamatórios, e que também ocorre acúmulo do ligante Gas6 e das formas solúveis dos receptores nos pulmões de animais infectados. Para avaliar o papel de Axl e MerTK na resistência à infecção por Mtb, inicialmente avaliamos se a deficiência dos receptores altera a resistência à infecção por Mtb in vitro em macrófagos. Observamos que células Axl-/- e MerTK-/- controlam de maneira mais eficiente a replicação bacteriana intracelular em comparação a células C57BL/6 na ausência de estímulos, mas na presença da ativação por IFN-γ não há diferença entre a carga bacteriana de células C57BL/6, Axl-/- ou MerTK-/-, embora a produção de óxido nítrico por macrófagos Axl-/- ativados tenha sido maior do que a de células C57BL/6 e MerTK-/-. In vivo, observamos que camundongos Axl-/- exibiram mortalidade aumentada em comparação com animais C57BL/6 e MerTK-/- após infecção com alta dose de Mtb. Após 3 semanas de infecção, observamos principalmente uma maior infiltração de neutrófilos nos pulmões de camundongos Axl-/- em comparação aos demais grupos. Adicionalmente, os níveis de IL-1β e TNF-α em homogenatos de pulmão, bem como a produção de IFN-γ e TNF-α por células T CD4+ camundongos Axl-/- foram maiores em comparação aos outros grupos. Não houve, entretanto, diferença nas cargas bacterianas pulmonares entre os grupos. Em paralelo, observamos que o bloqueio farmacológico de Axl resultou em maior suscetibilidade à TB experimental, uma vez que os animais se tornaram moribundos 24 dias após infecção, fenômeno não observado em animais tratados com veículo ou inibidor de MerTK. A mortalidade não esteve associada com descontrole de replicação do patógeno, uma vez que a carga bacteriana pulmonar foi similar em animais não tratados ou tratados com inibidores de Axl ou MerTK. Entretanto, camundongos tratados com inibidor de Axl exibiram números aumentados de neutrófilos nos pulmões em comparação com os grupos controle e tratado com inibidor de MerTK. Sendo assim, esses resultados sugerem que a sinalização através do receptor Axl desempenha papel de proteção durante a TB, ao suprimir o excesso de inflamação pulmonar, que é prejudicial para o hospedeiro durante a infecção por Mtb.