Ação antimicrobiana de pastilha higienizadora comercial e soluções experimentais de quitosana sobre biofilme multiespécies desenvolvido nas superfícies de resina acrílica e liga metálica de cobalto-cromo

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Raile, Priscilla Neves
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Ação antimicrobiana; Antimicrobial action; Chitosan; Denture cleansers; Higienizadores de dentadura; Prótese parcial removível; Quitosana; Removable partial denture
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58131/tde-06102022-152230/

O objetivo desse estudo foi avaliar a ação antimicrobiana de soluções experimentais de quitosana (SQ) e quitosana nanoparticulada (QN), em comparação à pastilha higienizadora de prótese (Nitradine - Ni), sobre biofilme multiespécies, composto por Candida albicans (Ca), Candida glabrata (Cg), Staphylococcus aureus (Sa) e Streptococcus mutans (Sm), desenvolvido sobre os materiais da Prótese Parcial Removível (PPR), resina acrílica (RA) e liga metálica de cobalto-cromo (Co-Cr). Cento e nove espécimes de Co-Cr (12 mm x 3 mm) e 109 de RA (14 mm x 4 mm), em forma de disco foram utilizados no experimento. O biofilme foi formado a partir da inoculação com solução à concentração de 1 x 107 UFC/mL. Após 48 horas de crescimento e maturação do biofilme, foi realizada a imersão simultânea (15 minutos) nas soluções higienizadoras. As variáveis avaliadas foram: ação das soluções sobre os microorganismos por meio da contagem de colônias (UFC/mL; n=9); ação sobre o metabolismo celular (método XTT; n=9); avaliação quantitativa (microscopia de fluorescência [MF]; n=2) e qualitativa [microscopia confocal de varredura a laser (MC); n=1] do biofilme residual; avaliação quantitativa (MF; n=2) e qualitativa (MC; n=1) da substância polimérica extracelular (SPE) no biofilme; análise qualitativa da superfície do biofilme [microscopia eletrônica de varredura (MEV), n=1] e espessura do biofilme (µm, MC; n=2). A análise estatística foi realizada (&alpha;=0,05) e quando a distribuição dos dados se apresentou normal, utilizou-se ANOVA e pós-teste de Tukey. Caso contrário, o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis foi utilizado, seguido pelo pós-teste de Dunn para comparação dos grupos. Ni reduziu o número de UFC/mL de todas as espécies avaliadas, nas superfícies de Co-Cr (Ca, p<0,001; Cg, p<0,001; Sa, p=0,002; Sm, p<0,001) e RA (Ca, p<0,001; Cg, p<0,001; as, p<0,001; Sm, p<0,001). SQ foi capaz de reduzir UFC de Ca no biofilme formado sobre Co-Cr (p<0,001) e, tanto na superfície de Co-Cr como de RA, apresentou resultados intermediários contra Sa e Sm. QN apresentou valores intermediários contra Ca nos biofilmes sobre Co-Cr e RA. Ni propiciou redução da atividade metabólica dos biofilmes desenvolvidos em Co-Cr (p<0,001) e RA (p<0,001). Somente Ni foi capaz de reduzir a quantidade de células viáveis [(Co-Cr (p<0,001), RA (p<0,001)] e de SPE [Co-Cr (p<0,001), RA (p<0,001)] no biofilme de ambas as superfícies. As imagens obtidas por MC e MEV sugerem potencial de penetração de SQ e QN e, embora apresente capacidade de remover o biofilme, o grupo Ni apresentou biofilme residual em ambas as superfícies avaliadas. Os biofilmes formados sobre Co-Cr apresentaram maior espessura após imersão em QN (p<0,001) e Ni (p<0,001) e os biofilmes sobre RA apresentaram maior espessura após imersão em SQ (p=0,022), enquanto QN e Ni proporcionaram valores intermediários. Análises qualitativas indicam que SQ apresenta capacidade de penetrar no biofilme, além da ação contra Ca em superfície metálica e redução intermediária das espécies bacterianas em ambos os materiais. Os resultados mostram que SQ foi capaz de reduzir o número de C. albicans em superfície metálica e apresentou efeito intermediário contra as espécies bacterianas sobre resina acrílica e liga metálica. As análises qualitativas indicam potencial de penetração no biofilme. A solução QN mostrou efeito intermediário contra C. albicans em ambos os materiais, além do potencial de penetração no biofilme. A imersão em Ni foi capaz de reduzir todas as espécies testadas e apresentou ação sobre a atividade metabólica e viabilidade do biofilme, porém as análises tridimensionais mostram aglomerações celulares persistentes. Sendo assim, nenhuma solução removeu totalmente o biofilme de ambas as superfícies avaliadas. Diante das observações, concluiu-se que as soluções a base de quitosana podem ser uma alternativa interessante como higienizador de prótese dentária.