Influência do ácido eicosapentaenoico e ácido docosahexaenoico na migração de células de glioblastoma humano e sua relação com a proteína Caveolina-1

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Lopes, Gustavo Henrique da Silva
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Ácidos graxos; Caveolin-1; Caveolina-1; Fatty acids; Glioblastoma; Migração; Migration; Omega 3; Ômega-3
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-23082023-161632/

Introdução: O glioblastoma (GBM) é um câncer com perfil altamente agressivo e sem tratamentos eficazes até o momento, gerando um mau prognóstico para os pacientes. Tem perfil migratório rápido e metabolismo lipídico alterado. Esse alto perfil migratório faz com que as células se espalhem rapidamente pelo tecido nervoso formando novos focos tumorais. A caveolina-1 (CAV-1) é uma das proteínas conhecidas que modula a migração celular e é altamente expressa no GBM. O ácido eicosapentaenoico (EPA) e o ácido docosahexaenoico (DHA) são dois ácidos graxos ômega-3 de cadeia longa que já são conhecidos por modular a migração e invasão celular, além de participar da biogênese das gotículas lipídicas (LD). Objetivos: Investigar a influência de EPA e DHA na migração e acúmulo de LD em células GBM além da expressão gênica e proteica da CAV-1 nestas células após exposição a EPA e DHA. Métodos: Neste estudo, foram utilizadas as linhagens celulares de glioblastoma humano U87MG e T98G. Os ensaios de ferida e transwell foram realizados para avaliar a migração e transmigração das células GBM, respectivamente. As células foram tratadas com 100µM de EPA ou DHA, ou controle com albumina (BSA) por 72 horas para ensaio de ferida e 24 e 72 horas para transwell. O PCR em tempo real foi realizado para avaliar a expressão gênica de CAV-1 em células GBM sob tratamento com EPA ou DHA. O ensaio de Western Blot foi realizado para avaliar a expressão da proteína CAV-1 nas células tratas com EPA ou DHA. Para visualização das gotículas lipídicas, as células foram coradas com oil red em 24, 48 e 72 horas após os tratamentos com EPA ou DHA. Resultados: Os resultados do ensaio de ferida indicaram que DHA e EPA aumentaram significativamente a migração de T98G quando comparados com o controle. Nem EPA nem DHA alteraram a transmigração em ambas as linhagens celulares e tempos de tratamento. EPA e DHA foram capazes de reduzir os níveis de mRNA de CAV-1 em ambas as linhagens celulares. O Western blot mostrou que EPA e DHA tem uma tendência maior de aumentar a expressão de CAV-1 em T98G quando comparado com U87MG. A coloração oil red mostrou acúmulo de LD nas células tratadas com EPA e DHA, enquanto o controle não apresentou formação considerável de gotículas lipídicas. Conclusão: Os resultados sugerem que EPA e DHA participam moderadamente na modulação da migração celular. Eles aumentam o acúmulo de LD, bem como a expressão proteica de CAV-1 e isso possivelmente aumenta o perfil migratório das células T98G. EPA e DHA também reduzem a expressão do gene CAV-1. A relação entre ácidos graxos, CAV-1 e o processo migratório ainda são pouco explorados em GBM, e indica que mais estudos devem ser feitos para elucidar essa relação.