Desenvolvimento de método cromatográfico compatível com LC-MS, indicativo de estabilidade para associação de losartana potássica e hidroclorotiazida em comprimidos pela abordagem Quality by Design e avaliação de incertezas

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Rocha, Ariel Lucas
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Analytical development; Cromatografia líquida de alta eficiência; Desenvolvimento de método; Espectrometria de massas; Estudo de estabilidade; High performance liquid chromatography; Mass spectrometry; Quality by Design (AQbD); Stability study
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9139/tde-18082023-154055/

O conceito de Analytical Quality by Design (AQbD) vem como uma alternativa mais robusta, econômica e cientificamente embasada para o desenvolvimento analítico, em detrimento ao OFAT (one fator at a time). Esse novo entendimento aplicável ao desenvolvimento é recomendado uma vez que se pode obter flexibilidade regulatória e garantir resultados mais confiáveis ao longa da vida do produto. Aplicou-se essa nova abordagem a fim de elaborar um método analítico indicativo de estabilidade para um produto farmacêutico de associação entre a Losartana Potássica e a Hidroclorotiazida, considerado a primeira linha potencial para o tratamento de hipertensão. A primeira etapa do desenvolvimento analítico consistiu no levantamento bibliográfico das propriedades físico-químicas das moléculas em questão para definir um método inicial. Após a definição das condições analíticas iniciais, utilizou-se as ferramentas estatísticas de planejamento de experimentos (DoE) para as etapas de triagem e otimização. Na etapa de triagem optou-se pelo delineamento de Plackett-Burman, utilizando 11 fatores e 2 níveis, pelo qual foi possível avaliar inúmeras variáveis e determinar suas significâncias em relação as respostas. A seguir, realizou-se a otimização com o delineamento experimental de compósito central com 4 fatores e 5 níveis, que permitiu modelar uma superfície resposta complexa e avaliar os fenômenos de interações entre os fatores. Dessa forma, as condições analíticas otimizadas foram definidas, considerando-se gradiente de ácido fórmico 0,3% como eluente A e uma mistura de acetonitrila e metanol (80:20) como eluente B, coluna cromatográfica X-Bridge C18 (150mm x 4,6mm x 3,5μm), temperatura da coluna de 40ºC, fluxo de 1,3 mL/minuto, volume de injeção de 10μL. Através dessa metodologia, foi possível realizar a identificação de um produto de degradação desconhecido da Hidroclorotiazida, formado pela reação com a lactose (excipiente presente na formulação do medicamento), comprovando que o método pode ser aplicável tanto à detectores de DAD como em detector de espectrometria de massas. Também foi comprovada através do estudo de degradação forçada que o método é indicativo de estabilidade, além de ser validado e robusto para o seu propósito.