Estudo do status oxidativo durante a refrigeração de sêmen de cães

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Kawai, Giulia Kiyomi Vechiato
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Canine sperm; Espécies reativas de oxigênio; Espermatozoides caninos; Estresse oxidativo; Lipid peroxidation; Malondialdehyde; Malondialdeído; Oxidative stress; Peroxidação lipídica; Reactive oxygen species
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-30032022-150820/

O sêmen refrigerado de cães apresenta maior taxa de concepção, facilidade no transporte, pois dispensa a utilização de nitrogênio líquido e fácil aplicação na inseminação artificial pela via intravaginal em relação ao sêmen criopreservado. Entretanto, os espermatozoides sofrem uma modificação em sua estrutura lipídica ao passar da fase líquido-cristalina para fase gel levando a alteração na permeabilidade e resistência da membrana plasmática. A característica espermática que confere maior resistência à membrana plasmática é a alta concentração de ácidos graxos poli-insaturados (PUFAs), predominantemente o ácido docosahexaenoico. Por outro lado, os PUFAs tornam os espermatozoides mais suscetíveis à peroxidação lipídica. Neste contexto, avaliou-se a suscetibilidade de espermatozoides de cães refrigerados a 5ºC, durante 24 horas, após a incubação com as diferentes espécies reativas de oxigênio: superóxido (O2 •- ), radical hidroxila (OH•), soluções de peróxido de hidrogênio (H2O2) e o subproduto da peroxidação lipídica, malondialdeído (MDA). Além disso, objetivamos determinar a terapia antioxidante ideal para a refrigeração seminal de cães nas condições aqui apresentadas. Ejaculados provenientes de 10 animais hígidos (N = 10), entre 2 e 6 anos, foram coletados e refrigerados (50×106 espermatozoides/mL) durante 24 horas. Posteriormente, foram submetidos ao desafio oxidativo pela incubação com os sistemas geradores de superóxido, radical hidroxila, soluções de peróxido de hidrogênio e malondialdeído. As amostras foram analisadas quanto à cinética espermática (CASA Computer Assisted Sperm Analysis), integridade de membrana plasmática (Eosina-Nigrosina) e acrossomal (Fast-green Rosa-bengala), atividade mitocondrial (3, 3 diaminobenzidina), peroxidação lipídica (ensaio TBARS) e quanto à atividade enzimática da superóxido dismutase. Para a análise estatística, utilizou-se o teste LSD (Least Significant Difference), considerando-se nível de significância inferior a 0,05 para efeito significativo.