Avaliação de modelos in vitro para o estudo da inativação do cromossomo X em humanos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2023
Autor(a) principal: Orsi, Ana Elisa Ribeiro
Orientador(a): Não Informado pela instituição
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Programa de Pós-Graduação: Não Informado pela instituição
Departamento: Não Informado pela instituição
País: Não Informado pela instituição
Palavras-chave em Português:
Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/41/41131/tde-23102023-180216/
Resumo: A inativação do cromossomo X (ICX) é um processo de compensação de dose que ocorre nas células fêmeas de mamíferos placentários. A ICX em humanos inicia-se por volta do estágio de blastocisto, e seu entendimento é prejudicado pelas dificuldades associadas ao uso de embriões em pesquisa. Para lidar com esse problema, nós avaliamos diferentes modelos para o estudo da ICX in vitro. Células no estado primed exibiram expressão monoalélica do gene MECP2, ligado ao cromossomo X, e uma única nuvem de XIST. Após conversão para o estado naive, expressão bialélica do gene MECP2 foi observada, assim como a ausência de nuvens de XIST durante as primeiras duas passagens. Avaliação de EPSCs in vitro e in silico sugeriram que essas células já passaram pelo processo de ICX. Resultados similares foram observados para células cultivadas no meio 4CL. Depois de nova conversão para o estado primed, células naive cultivadas em 5iLA passaram pela inativação do mesmo alelo do gene MECP2 previamente inativo. Por outro lado, blastoides gerados a partir de células cultivadas no meio PXGL demonstraram ICX progressiva e aleatória, apesar de viés para re-inativação do alelo de MECP2 previamente inativo ter sido observado. Esses resultados sugerem que blastoides humanos podem ser usados para o estudo da ICX humana in vitro.